采用固相微萃取技术测定啤酒香味组分地研究.pdfVIP

GC-046 采用固相微萃取技术测定啤酒香味组分的研究 胡国栋张晓磊程劲松 (中国食品发酵工业研究院国家食品质量监督检验中心北京100027) 啤酒香味的组成极其复杂，含量低微，研究建立准确快捷的定量测定方法是使啤酒工业 向质量稳定方向迈进的重要技术途径。目前国内外普遍采用的顶空进样或吹扫一捕集法仅能 分析啤酒的十余种挥发性组分，且设备昂贵，对于一些较难挥发的脂肪酸等重要组分，则只 能依赖溶剂提取法。 固相微萃取(SP托)是上世纪九十年代发展起来的样品处理新技术，它摒弃了传统的溶 剂操作，并将萃取、浓缩、进样集于一体，灵敏度高且操作简便。在啤酒分析中采用SPME 的工作始于1997年“1，近年比较成功的方法则首推Hill完成的1i种含硫化合物的分析研 究o’，至于使啤酒的主要脂肪酸与醇、酯、醛等主要组分在一次进样中实现定量分析的研究， 则迄今未见报道。本研究采用HS-SPME方式，在优化了各种操作条件后，建立了一套系统测 定18种主要香味组分的定量分析法，它既覆盖了顶空进样法能完成的挥发性组分，又将分 析对象延伸至较难挥发的组分，如B一苯乙醇、乙酸苯乙酯、乙酸、异戊酸、己酸、辛酸、 癸酸及里哪醇的定量测定，从而实现了一次进样即可构筑啤酒香味组分“骨架”的目标。 l实验部分 1．1仪器 气相色谱仪：SP一2000C型。北京北分瑞利集团公司； 气相色谱一质谱联用仪：HP5988A型； 司产品。 1．2试剂 所测定组分均备有标样，部分为国内商品，部分购自美国Aldrich公司。 I．3实验条件 i．3．1样品的制备 在20mL顶空进样瓶中，加入圆体NaCI39，注入lOmL事先预冷的啤酒，移入0．10mL 浓度为500mg／L的4一甲基一2一戊醇溶液，加盖密封垫和铝帽，压紧，电磁搅拌混匀。 将SphE装置插入，并使萃取头伸出至距样品液面约5mm处，在40。C水浴中保温30min， 随后从顶空瓶中取出SPME萃取头并直接插入Gc进样口，解吸时间为5min。 i．3．2色谱条件 作Gc分析的色谱柱为DB—WAXETR(30mXO．545mmX1．OWn)，不分流进样，载气为高纯 测器温度为250℃。 He，EI离子源，接口温度：22012，离子源温度：200C，色谱拄柱温条件与Gc基本相同。 2结果与讨论 2．i萃取头极性的考察 头作了比较。尽管后者是国外作酒类分析的常用类型，但它对有机酸的萃取效果较差，考虑 到我们的目标是醇、酯、酸的全部分析，因此选择85pmPA为本研究的工具，并采用Hs取样 方式，以延长萃取头的使用寿命。 2．2萃取条件的考察 本研究对萃取时间、萃取温度、顶空瓶中样品体积等条件进行了考察。不同组分对上述 条件改变时所产生的响应均有变化，综合考虑各种因素后，确定本研究的萃取条件为：40 ℃保温，萃取时间30min，20mL顶空瓶，样品体积为lOmL。 2．3组分的分离及定性结果的确认 图1是啤酒样品的典型色谱图，标示的19种组分(含内标)除以GC／Ms确认外，并均 以标样一一作了核对，它们包括5种醇类、7种酯类、5种脂肪酸与1种醛类。可以认为， 这些组分构成了啤酒香味的“骨架”，它既包括了采用顶空分析或吹扫一捕集法己可实现的高 级醇、挥发酯和乙醛的分析，而且将测定对象延伸到较难挥发的13一苯乙醇、乙酸苯乙酯、 里哪醇及5种游离脂肪酸，而这些组分的含量多寡恰恰决定着啤酒的“酵母味”、“酒花香” 等风味特征的量化评价，它们的测定，在啤酒的质量控制中占有重要的地位。 图l啤酒样品的典型色谱图 1．乙醛，2．乙酸乙醇，3．乙酸异丁酗，4．正丙醇，5．异丁醇，6．乙酸异戊醣。7．4一甲基一2_戊醇(内标)， 8．异戊醇，9．己酸乙醋。10．辛酸乙酿，11．乙酸，12．里哪醇。13癸酸乙酯，14．异戊酸，15．乙酸苯 乙醋，16．已酸，17．B一苯乙醇-18．辛酸，19．癸酸 2．4内标法定量与测定结果的重复性 对于组分复杂的啤酒样品而言，如何通过SPME方法获得准确而可重复的定量测定结果， 乃是方法的关键所在。除了严格控制各种操作条件的一致性外，我们并经反复试验，选用了 4一甲基一2一戊醇作为内标。定量校正因子则以乙醇水溶液作基质，加标至啤酒含量范畴后加 以测定。采用同一种啤酒样品，在不同时日作测定，对其中的12种组分而言，RSl3均小于 10％，部分组分重复性稍差，