豚鼠银屑病样动物模型中角蛋白K14、16、17表达水平地研究.pdfVIP

中华医学会第十次全国皮肤性病学术会议论文汇编 233 病与皿感染有关。PCR法敏感特异快速，用于检测EN患者外周血TBDNA有一定的价值。 69．电镜x射线显微分析法在继发性血色病研究中的运用 浙江大学医学院附属二院(310009)劳力民朱可建孙国钧 √敏 日本福井医科大学皮肤科 熊切正信 复输血、长期铁剂摄取可引起继发性血色病。本文应用透射电镜并结合电镜x射线显微分析法(X—my 了真皮巨噬细胞内高电子密度颗粒的结构特征。 材料和方法5例继发性血色病，男4例，女l例，平均年龄55．6岁，发病原因分别为大剂量铁剂 注射或长期口服。方法：皮肤活检组织双重固定，EPON一812包埋，超薄切片后铜载网载取切片，铀一 铅染色，13立H一7000型透射电镜观察摄影。另一部分超薄切片用尼龙载网载取后，直接在透射电镜下 析装置进行元素分析。 结果5例患者表皮细胞无明显变化，各层除黑素颗粒外无特殊颗粒沉积，但基底细胞和基底层黑 紊细胞中黑素颗粒均增加，并常可见色素颗粒复合体。真皮全层可见形态各异的巨噬细胞，多数散在分 布，部分区域3—5个巨噬细胞聚集在一起，细胞内带有数量不等的高电子密度颗粒，常有单层膜包绕。 根据有无膜包绕，以及内容物的形状，可将高电子密度颗粒分成5型。对1例患者的色素沉着和非色素 沉着部位皮肤组织作了比较观察，发现两部位的真皮中都可见大量高电子密度颗粒，而色素沉着部位角 朊细胞中黑素颗粒明显增多。 对巨噬细胞和毛细血管内皮细胞内的高电子密度颗粒进行X射线显微元素分析显示，在第1。5型 颗粒及巨大颗粒中除出现锇、氯小峰外，主要是铁元素的尖耸高峰。 讨论本文用x射线显微分析法证实皮肤细小血管周围、真皮巨噬细胞中的高电子密度颗粒是含 铁颗粒。在皮肤色素沉着和非沉着部位均含有含铁颗粒，表明皮肤色素沉着主要与黑素颗粒增加有关， 活检部位不必非选色素沉着部位不可。皮肤中含铁颗粒存在是提示体内铁负荷过多的一项有用指标，有 助于该类患者的病因诊断。 70．豚鼠银屑病样动物模型中角蛋白 K14、16、17表达水平的研究 樊平中廖文俊刘玉峰 第四军医大学西京医院(710032) !银屑病的发病机理极其复杂，其组织病理学的改变主要表现为角质形成细胞过度增殖、炎症细胞聚 集和真皮乳头部血管扩张三大特征。其中，角质形成细胞过度增殖常常伴有异常的角化过程，同时出现 角蛋白表达的改变。为了能够更好的研究银屑病的发病机制，合适而科学的动物模型显得极为重要。胁，，、 nj的目的是从分子水平研究心得安外涂所致豚鼠银屑病样动物模型的可行性。l i彳、／ 中华医学会第十次全国皮肤性病学术会议论文汇编 心提供。5％心得安乳剂由西京医院药剂科配制。自行设计角蛋白K14、16、17探针，由北京奥科公司 合成，原位杂交试验盒购自博士德公司。 方法①模型制备：实验动物随机分为两组，实验组20只应用5％心得安乳剂均匀外涂双耳背皮 肤，每日3次，连续涂4周。对照组lo只用单纯乳剂涂抹。4周后取双耳背部皮肤，一只耳用10％福 尔马林固定，另一只耳至于干燥瓶中，存放于一80℃低温冰箱保存。②HE染色：将用10％福尔马林固 定的标本脱水，透明浸蜡后包埋，制作石蜡切片，常规HE染色。在光镜下逐一观察组织学所见。③原 位杂交：至于干燥瓶中的组织经常规脱水、浸蜡包埋后切片，厚度6ttm，展开在经多聚赖氨酸处理的载 玻片上，切片经常规脱蜡脱水，3％琏02室温处理lOmin以灭活内缘性过氧化物酶，P／3S洗5minx3次。 滴加胃蛋白酶工作液，370C消化10min，充分暴露mRNA，o．5M 张切片上加20出含标记探针的原位杂交液，盖上专用盖玻片，置湿盒中37C杂交过夜。同时设不加探 X 针的空白对照。分别用30C的2 PBS 洗2minX 3次。滴加SABC，7℃