朊蛋白106-126肽段对PC12细胞分化后致凋亡作用地研究.pdfVIP

中国人兽共患病杂志 !竺!!：!!!!! 竺坐竺!竺!!!竺!!!圣竺!!!!!! 竺! 可证的农户不得饲养畜禽；b)国家从资金和政策上鼓励和支持农户集约化圈养 或围养当地品种的畜禽，一方面保证其产品的口味仍然很好，另一方面使得畜禽 的自由饲养从经济上而言更不合算；c)通过乡村两级干部督察和群众举报以及 一定的奖惩措施，对发现自由饲养畜禽的农户进行处罚。 3．在国家规划的无规定动物疫病区和经济比较发达东部地区取得一定的经 验和成果后，进行总结，依据各地情况推广到全国其他地区。 12细胞分化后致凋亡作用的研究 朊蛋白106-126肽段对PC 张东威 南善姬 赵节绪 30021) 吉林大学第一医院神经内科 (长春1 朊蛋白病是由朊蛋白引起的海绵状脑病，是一组包括遗传性、散发性和传染 12细胞形成神经元样细胞， 有许多相似的生物学作用。本研究利用NGF诱导PC 加入106-126肽段，观察到了一系列的形态学变化及其致凋亡作用，探索在细 胞水平上建立了传染性朊蛋白病模型的可能性。 l材料和方法 1．1主要试剂和仪器(略) 1．2细胞培养PCI2细胞购自中科院上海细胞库保存，源于美国典型培养 培养基常规培养。加入50ng／ml神经生长因子(NGF)后细胞出现突起，形成 神经纤维，交织成网络，分化成为神经元样细胞。实验组加入106-126肽段致 终浓度为100uM，对照组加入等体积的PBS，3天后观察形态改变，检测指标。。 1．3MTT法测细胞存活率(操作过程从略) 1．4荧光染色(样品处理过程从略) 1．5透射电镜观察(样品处理过程从略) 1．6流式细胞术检测细胞周期(样品处理过程从略) 1．7DNA电泳(样品处理过程从略) 2 结果 2．1细胞存活率正常对照组为98．1±1．9％，实验组为69．2±4．7％，细 胞存活率显著下降，两组间差异有显著性，P0．05。 2．2光学显微镜观察与正常对照组相比，感染肽段后细胞折光性变弱， 贴壁不良，突起变短、消失，突起相互交织组成的网络受到破坏，胞体皱缩，胞 内可见颗粒状物，部分脱落成悬浮细胞，数目减少(附图)。在荧光显微镜下， 感染肽段的细胞突起缩短，凋亡细胞胞核固缩成圆珠状，被溴化乙啶染成橘红色。 2．3电子显微镜观察与正常对照组相比，感染肽段的细胞胞体圆缩，核 膜不完整。核移位，染色质凝集，呈块状或新月状分布在核膜边缘。部分胞核呈 碎块状，核的碎块被包裹成凋亡小体。线粒体肿胀，内质网增生，空泡化严重。 中国人兽共患病杂志 rnaIofZoonoses 100 ChineseJou 2．3 细胞周期的检测 经流式细胞术检测，试验组细胞在G1期前出现亚 二倍体峰，平均凋亡率为28．2±2．1％；正常对照组没有G1期前的亚二倍体峰。 2．4 DNA电泳收集细胞提取DNA行琼脂糖凝胶电泳，试验组电泳呈典 型的凋亡梯状带。 著下降，发生一系列的形态学变化，细胞发生凋亡现象。这一系统能够较好地反 映朊蛋白106-126肽段的细胞毒性，有望成为传染性朊蛋白病的细胞学模型。 低温对家蝇卵及蛹的影响 许兵红 孙斐 53003) 新乡医学院寄生虫学教研室 (河南新乡4 为探讨低温对家蝇卵孵化率以及蛹羽化率的影响，选取室内连续饲养的家蝇 第4代卵，置于2。C分别处理1天、2天、3天、4天、5天后，取出置于室内(26 ℃)孵化，记录处理不同时间后的孵化率。第4代1日龄蛹和3日龄蛹，分别置 于2。C和6。C处理1天、2