三氯乙烯药疹样皮炎细胞免疫学指标及发病机制研究---毕业论文.docVIP

目 录 中文摘要 1 英文摘要 6 英文缩写词表 12 前 言 14 第一部分 TCE药疹样皮炎细胞免疫学指标及发病机制研究 19 第一节 TCE药疹样皮炎患者外周血淋巴细胞抗原特异性增殖功能测定 21 第二节 TCE药疹样皮炎患者外周血免疫细胞检测分析 26 第三节 Fas/FasL与PF/GrB介导的TCE免疫毒作用机制探讨 37 小 结 55 第二部分 8例TCE药疹样皮炎患者病例报告分析 56 小 结 71 总 结 72 致 谢 74 参考文献 76 附录1 生物标志物的验证及其在健康危险预警中的作用 86 附录2 个人简历 96 三氯乙烯药疹样皮炎细胞免疫学指标研究职业接触三氯乙烯（TrichloroethyleneTCE）引起的TCE药疹样皮炎是近年来我国职业卫生领域令人关注的问题，但目前关于该病的发病机制不，缺乏特异性治疗。 根据该病的发病特点一般认为其属于Ⅳ型超敏反应的可能性最大，Ⅳ型超敏反应发生的机制与抗体和补体无关，主要是T细胞介导的免疫损伤。T细胞介导的免疫反应发生的过程涉及到记忆性T淋巴细胞的生成和效应性T细胞的活化增殖，效应性T细胞通过分泌一系列细胞因子发挥作用，并调节B细胞、NK细胞以及其他各群免疫细胞的活化增殖。另外，细胞毒性T细胞（CTL）在T细胞介导的超敏反应中发挥重要的作用，其主要通过两条途径杀伤靶细胞，其一是穿孔素-颗粒酶途径，其主要参与免疫防御；其二是Fas-FasL途径，Fas/FasL主要介导活化的效应性细胞凋亡，清除激活的外周CTL，下调免疫应答。这两条途径对于机体对外来抗原进行适度的免疫应答，维持免疫自稳发挥重要作用。正常状态下，特异性淋巴细胞在外周免疫器官接受抗原刺激而大量增殖，在免疫应答末期，机体通过Fas/FasL细胞凋亡机制使发生活化的T细胞凋亡，从而对免疫过程进行严密调控，以维持免疫自稳。因此，TCE药疹样皮炎的的发生可能是由于机体免疫自稳状态被打破，发生过强的免疫应答反应所致。 为验证上述假说，本研究采用设计以及TCE药疹样皮炎入院治疗以及时细胞免疫学指标的比较分析，进一步探讨细胞免疫与TCE药疹样皮炎的关系。研究结果如下： 一、TCE药疹样皮炎研究 本研究选择三组研究对象，病例组TCE药疹样皮炎患者接触对照组TCE作业工人；非接触对照组为从未接触过TCE的工人。三组研究对象按年龄性别进行匹配后，结果如下： 1.淋巴细胞特异性增殖功能谷丙转氨酶（ALT升高93.33%）；谷草转氨酶升高73.33%）。三组研究对象外周血淋巴细胞分别与不同浓度TCE（0.2mmol/L、1 mmol/L、5 mmol/L在各组内随着TCE染毒浓度的增加外周血淋巴细胞的存活率逐渐降低，差异有统计学意义(p0.05)，细胞的存活率组间差异无统计学意义(p0.05)，提示TCE本身具有细胞毒性，而在TCE药疹样皮炎TCE接触对照体内并不存在针对TCE的特异性记忆性淋巴细胞。 血常规结果6例高于正常参考值范围，1例低于正常参考值范围；6例MONO）高于正常参考值范围；14例NEUT）高于正常参考值范围；8例EO）高于正常参考值范围，2例低于正常参考值范围，8例BASO）高于正常参考值范围。在接触对照组和非接触对照组体内上述指标均在正常参考值范围内。比较各组之间淋巴细胞群在外周血中的变化情况。外周血CD4+T细胞高于接触对照组和对照组(p0.05)(p0.05)，提示这三个指标可作为TCE药疹样皮炎的疾病标志； CD8+T细胞CD8+CD28-T细胞病例组接触对照组对照组(p0.05)，CD3-CD56+细胞病例组接触对照组对照组(p0.05)。外周血F/FasL、PF/GrB的测定病例组外周血CD8+细胞高于接触对照组和非接触对照组，差异有统计学意义（p0.05），在接触对照组和非接触对照组之间差异无统计学意义（p0.05）；CD4+T细胞（p0.05）（p0.05）CD8+T细胞病例组接触对照组非接触对照组差异有统计学意义（p0.05）PF蛋白在外周血淋巴细胞中表达高于接触对照与非接触对照组(p0.05)，而在接触对照组与非接触对照组之间无显著性差异(p0.05)。GrB在接触对照组 (p0.05)，病例组和接触对照组间差异无统计学意义(p0.05)。CD8+CTL随血液循环迁移至皮肤、肝脏、肾脏等组织器官，通过与这些组织细胞表面的FAS蛋白结合介导靶细胞的凋亡。同时病例组体内通过活化的CTL高表达PF和GrB蛋白，介导皮肤角质细胞的死亡，引起TCE药疹样皮炎患者皮肤的损伤。而健康的TCE接触对照工人体内也存在活化的细胞毒性T细胞（CD4+CTLCD8+CTL）Fas mRNA表达FASL mRNA表达mRNA表达mRNA表达二、TCE药疹样皮炎