人工异源四倍体(Cucumis+hytivus)染色体组间重组的细胞学与分子标记研究.pdfVIP

人工异源四倍体(Cucumis 组的细胞学及分子标记研究· 庄飞云1’2，陈劲枫k，钱春桃1，罗向东1，雷春1 (1作物遗传与种质创新国家重点实验室，南京农业大学，南京210095；2中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081) Chert 摘要：本文采用细胞学和分子标记方法对甜瓜属人工异源四倍体(c andKirkbride， hyul’us 2n=4x=38)的亲本染色体组间的交换重组进行了研究。通过对减数分裂中期I染色体行为观察，在108 个花粉母细胞中有50个细胞具有多价体。占46．3％，染色体的平均构型为 400余条随机引物进行筛选．有5条引物产生了6条c衄f栅特征带。选取其中3条转换成SCAR标 记，对13种甜瓜属不同基因型材料的DNA进行扩增，结果仅有SAP-03H00标记表现为特异性。进一 sativus sativus 步分析这一标记在人工异源四倍体(c vKr．sativus)及野生黄瓜(c hytivus)、栽培黄瓜(c vRr,hardwickii)中扩增出的3条不同分子量条带序列，发现两端序列较为一致，中问部分不同，与黄瓜 线粒体基因组序列有200bp左右的大小相同，但方向相反。 关键词：甜瓜属；异源四倍体：交换重组；细胞学；逝i；j垂薹薹坠2、 远缘杂交是创造新物种、新材料的有效途径之一，同时可以向栽培作物中导入外源有益基因， 扩大作物的遗传基础，提高作物的抗病抗逆性等【l’2’3】。甜瓜属人工异源四倍体Cucum／s^wfvwChan 瓜chystm，2n=2x=24)和栽培黄瓜(c 本的染色体数目不同，但同工酶和分子标记研究结果表明两者存在着较近的亲缘关系【6。7】，c hytivus可作为遗传桥梁，将野生种的优良基因导入栽培黄瓜中，改善遗传基础狭窄的黄瓜“基因 池”，扩大黄瓜的遗传变异。 远缘杂交中，外源基因的导入主要是通过染色体组间的交换重组，形成新的配子传递给后代 ”“～。现代先进的细胞学及分子标记技术为精确追踪外源遗传物质在后代中的遗传提供了有效手 段【14““。”J。本文对人工异源四倍体c hytivus减数分裂过程中染色体行为进行了观察，同时采 用RAPD标记寻找特征性标记，在转换成SCAR标记后进一步验证标记的特异性等，旨在探讨人 工异源四倍体中两亲本染色体组间的重组交换及特有分子标记，为通过远缘杂交实现黄瓜品种改 良提供重要的遗传基础。 自然科学基金(No；教育部跨世纪优秀人才培养计划。 +通讯作者(Authorfor correspondence)．E-mail：jfchan@njau．edu．cn 276 1材料与方法 1．1材料 本试验所用材料见表1，其中H1．2和H3-4为人工异源四倍体自交两代的不同单株，c1．56 与栽培黄瓜“北京截头”回交再自交获得的株系。各试材于2002年3月初在南京农业大学蔬菜实验 地大棚中进行育苗，4月初与回交三倍体组培苗一起定植于大田。 表I不同参试材料及其编号 Table1 andvarietiesinthe 0lcnm西species study ·1，南京农业大学蔬菜研究所{2，中国农业科学院蔬菜花卉研究所；3，荷兰瑞克斯旺种子公司；4，美国 威斯康辛大学园艺系。 Research of and +1，VegetableInstitute，Nanj吨AgriculturalUniversity；2，Institute Flowers，