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*/12 在线答疑：wy-fxhx@163.com chenh113@ 大 学 通 用 化 学 实 验 技 术 薄层色谱法分离鉴定叶绿素 实验122 薄层色谱法分离鉴定叶绿素 122.1 实验目的 (1) 掌握有机溶剂提取天然产物的原理和操作方法。 (2) 掌握薄层色谱法分离原理和实验技术。 122.2 实验原理 植物叶片中的叶绿体色素有叶绿素和类胡萝卜素两类，主要包括叶绿素a、叶绿素b、β-胡萝卜素及叶黄素等四种。 叶绿体色素是脂溶性色素，植物叶绿体色素通常可用乙醇、丙酮等有机溶剂提取。在波长662 nm、644 nm测定吸光值，可根据公式计算叶绿素a和叶绿素b的含量。通过薄层色谱(TLC)对叶绿体色素提取液进一步分离，可分离叶绿素a、叶绿素b、β-胡萝卜素及去镁叶绿素，经多次制备可得少量叶绿素纯品，并进行光谱表征。 122.3 实验步骤1. 大叶黄杨叶片预处理： 2. 叶绿体色素的提取： 称取1 g预处理过的大叶黄杨叶片 边加入提取剂 边快速研磨叶片 量取30 mL提取剂(95%乙醇) 研磨约10 min 通风橱中 用不锈钢网 滤去残渣 得到提取液 剪细碎 置于研钵 采集新鲜成熟大叶黄杨叶若干 投入沸水中 不断搅拌30 s 凉水中冷却 迅速捞起 分批 用滤纸吸干叶片表面水分 清水洗净 (1)提取液的粗提纯：