加味三拗汤治疗哮喘作用机理实验研究.pdf

中文摘要 中文摘要 支气管哮喘是由多种细胞(如嗜酸粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、 气道上皮细胞等)和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病。尽管西医学对哮喘病发病机 制和治疗方面的研究取得了较大进展，但其发病率在世界范围内仍有增高的趋势。因此， 对哮喘病发病机理的深入研究和寻找有效的治疗方法具有非常重要的意义。中医药治疗 哮喘具有悠久的历史和自身特色。传统的中药复方具有多靶点、多环节的作用特点，能 影响哮喘病的诸多病理过程从而起到治疗作用。借助现代生物医学手段明确中药对哮喘 的治疗作用并探讨其作用机理有助于从单味中药及中药复方中发现疗效可靠的哮喘新 药。加味三拗汤(Mx)是导师王庆国教授在古方三拗汤的基础上加味而成的。该方兼 顾哮喘病气郁、痰凝、瘀阻的病机特点，在临床中能有效控制哮喘发作期症状，对哮喘 缓解期治疗也起到一定的作用，具有一定的临床基础。本课题主要从MX的镇咳、祛痰、 抗炎作用，MX的平喘作用及支气管解痉作用，MX抗气道炎症的作用三个方面进行实 验研究，从而明确MX的治疗作用并部分阐明其作用机理。 l 目的 观察MX的镇咳、祛痰、抗炎作用。明确MX的平喘作用及其对离体气管平滑肌的 解痉作用。探讨MX对气道炎症的影响及MX抗气道炎症的作用机理。。 2 方法 以咳嗽潜伏期及咳嗽次数、酚红排泌量、耳肿胀度为指标，观察MX对小鼠氨水引 咳模型、小鼠气管酚红排泌法模型、小鼠二甲苯致耳肿胀模型的影响，从而明确MX的 镇咳、祛痰和抗炎作用。 制备卵蛋白(0VA)致敏豚鼠哮喘模型，观察MX的平喘作用；制备豚鼠离体气管 螺旋条，分别观察MX对磷酸组胺和氯化乙酰胆碱所致豚鼠气管平滑肌收缩的拮抗作 及哮喘豚鼠静息状态下气管平滑肌的松弛作用。 泡支气管灌洗液(BALF)中炎症细胞总数、分类计数和肺功能的影响。采用放免法观 IFN叫和IL．5的影响。 3 结果 3．1 MX的镇咳、祛痰、抗炎作用 3．1．1 MX对浓氨水致小鼠咳嗽反应的影响 MX和阳性药咳必清均能延长浓氨水致小鼠咳嗽的咳嗽潜伏期。与生理盐水组相比， ! 垫堕三塑塑堕堕竖堕堡星型j堡煦塞墼堡塞 MX小剂量组、咳必清阳性组有显著差异 MX中、大剂量组有极显著差异(pO．叭)， 用。 3．1．2MX对小鼠气管酚红排泌的影响 MX和阳性药氯化铵均能增加小鼠气管酚红排泌量。与生理盐水组相比，MX中剂 MX小剂量无显著差异(pO．05)。表明MX具有祛痰作用。 3．1．3 MX对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 MX小、中、大剂量组耳肿胀度与生理盐水组相比无显著差异(芦0．05)。表明MX 对二甲苯致小鼠耳肿胀的炎症反应没有明显的抗炎作用。 3．2MX的平喘作用及对豚鼠离体气管平滑肌的影响 3．2．1 MX的平喘作用 MX和阳性药地塞米松(Dex)均能延长OVA致敏豚鼠哮喘的引喘潜伏期。与模型 3．2．2 MX对豚鼠离体气管平滑肌的影响 MX对磷酸组胺和氯化乙酰胆碱引起的豚鼠离体气管平滑肌收缩有显著的拮抗作 用，对OVA刺激导致的OVA致敏豚鼠离体气管平滑肌的收缩有明显的舒张作用，MX 能降低正常及哮喘豚鼠气管平滑肌的静息张力，并具有明显的量效关系。 3．3 MX对OVA致敏大鼠实验性哮喘气道炎症的影响及其抗气道炎症作用机理的研究 3．3．1 MX对大鼠气道炎症的影响 模型组大鼠外周血EOS数、BALF中自细胞总数和EOS分类计数升高，与正常组 组相比， 比， O．05)。表明Mx能有效减轻大鼠实验性哮喘的气道炎症。 3．3．2MX对大鼠肺功能的影响 差异(p0．01)。表明MX能改善大鼠实验性哮喘的肺通气功能。 3．3_3 MX抗气道炎症作用机理的研究 3．3．3．1 MX对血浆及BALF中ET-1的影响 !壅塑墨 三 MX中、大剂量组、Dex 和阳性药Dex均能降低大鼠血浆ET-I水平，与模型组相比， 血浆及BALF中ET-1的水平。 3．3．3．2