乌头碱的代谢产物去氧乌头碱的生物转化及其电喷雾串联质谱.pdfVIP

V01．28 高等学校化学学报 No．11 2007年11月 CHEMICALOFCHINESEUNIVEILSlTIES 205l一2055 JOURNAL 乌头碱的代谢产物去氧乌头碱的生物 转化及其电喷雾串联质谱 赵宇峰1”，宋凤瑞1，越皓1，国新华1，辛惠琳1，刘志强1，刘淑莹1 (1．中国科学院长春应用化学研究所，长春130022；2．中国科学院研究生院，北京100039) 摘要采用人胚内细菌和乌头碱体外温孵的方法，探讨去氧乌头碱在人肠内的生物转化．利用离子阱和傅 里叶变换离子回旋共振质谱直接分析去氧乌头碱的转化产物．乌头类生物碱及其代谢产物在正离子电喷雾 质谱条件下形成质子化分子([M+H]+)，通过多级串联质谱进行结构表征．去氧乌头碱可被人肠内细苗转 化．通过脱酰基、脱甲基脱羟基以及酯化反应产生新型的单酯型、双酯型和脂类生物碱等10余种代谢产物． 双酯型的去氧乌头碱的毒性较高，当它被肠内细菌转化为单酯型和脂类生物碱时会使其毒性降低． 关键词去氧乌头碱；肠内细菌；生物转化；电喷雾串联质谱 中图分类号0657 文献标识码A 文章编号0251-0790(2007)11-2051-05 Carmichaeli 毛莨科乌头属植物附子、川乌(aconit,um De如．)和草乌(AconitumRewhb．)为 kusnezoffii DA)是其中的活性和毒性成分之一…．由于中药一般多为口服给药，其有效成分在到达吸收的靶器官 之前或被消化道吸收经胆汁排泄后，在肠道内受到肠内细菌的作用．肠道细菌中有许多酶，其种类和 数量远远超过肝脏，是人体的又一大代谢器官．因此，中药成分的肠内细菌代谢研究对于了解它的体 内代谢过程及其药效有着重要的意义”’．中药成分的代谢途径及其产物能为中药作用机理及活性成分 碱和脂类生物碱．其中，脂类生物碱的抗伤害活性和毒性均低于乌头碱”J．对人参四逆汤中生物碱的 研究结果表明，脂类生物碱提取组分具有抗休克作用”J． 我们近年来利用电喷雾串联质谱技术对含乌头类植物的化学成分及相关复方中药的配伍进行了系 统研究”11．为进一步阐明乌头碱在肠内的代谢过程，我们对乌头碱在人肠内细菌中的代谢进行了研 用离子阱电喷雾质谱仪的高灵敏度和多级串联的优势，结合傅里叶变换离子回旋共振质谱的高分辨率 技术直接分析乌头碱的代谢产物，并根据串联质谱的特征离子找出去氧乌头碱的代谢产物，对其化学 结构进行了表征，从而深化了对乌头碱和去氧乌头碱生物转化的认识． 1实验部分 1．1试剂与仪器 甲醇及二氯甲烷(分析纯，北京化工厂)．GAM培养基(日本日水公司)．去氧乌头碱(美国 司)．7．0T傅里叶变换离子回旋共振质谱仪(7．0TFTICRMS，美国IonSpec公司)． 1．2肠内细菌对去氧乌头碱的生物转化方法 将3．23rag乌头碱用0．2mL乙腈溶解，加入到10mLGAM培养基中．然后加入0．2 g健康成人的 收稿日期：2007_03—19 资助 en 联系人简介：刘姐莹，女，博士，研究员，博士生导师，从事质谱分析研究．E-mail：syliulg@yahoo．eom 万方数据万方数据 2052 高等学校化学学报 v01．28 新鲜粪便，于37℃厌氧培养．每隔24h提取样品一次，用二氯甲烷萃取，以3500r／rain速度离心，用 二氯甲烷提取液经0．45 pm微孔滤膜过滤，于一20℃保存，备用．分别用FinniganLCQ和lonSI)ec FTICP湛质谱仪检测． I．3 LCQMS条件