苯酚降解菌株GXY-1分离鉴定、降解及其粗酶特性研究.pdfVIP

第50卷第3期 大连理工大学学报 V01．50，NOo3 201 0 1 0 0年5月 of May2 JournalDalian of UniversityTechnology 苯酚降解菌株GXY-1分离鉴定、降解及其粗酶特性研究 周集体‘， 关晓燕， 曲媛媛， 李 昂， 苟 敏， 艾芳芳 (大连理工大学环境学院，辽宁大连116024) 摘要：从处理石化废水的活性污泥样品中分离得到一株能以苯酚为唯一碳源生长的菌株 GXY-1．通过形态特征、生理生化及16SrDNA序列分析，初步鉴定菌株GxY-l属于布鲁氏 杆菌属(Brucellasp．)．实验结果表明，菌株GXY-1对土霉素和四环素不敏感，其降解苯酚 的最佳条件为温度30℃，pH7．0．在最佳条件下，GXY—l对600 h mg／L苯酚的降解率在60 时达99％以上．同时GXY-1还可以利用苯胺、萘、氯苯等芳香化合物为唯一碳源生长．测定 了降解途径中相关酶的活性，表明菌株GXY一1是通过邻苯二酚1，2双加氧酶催化开环来降 解苯酚．该菌株粗酶的最适反应pH为7．8，最适反应温度为40℃． 关键词：苯酚；生物降解；布鲁氏杆菌；邻苯二酚1，2双加氧酶 中图分类号：X172文献标志码：A 0 引 言 1实验材料与方法 工业的不断发展造成了大量有毒污染废水的 1．1实验材料 排放，苯酚作为工业生产原料或中间体，是工业排 1．1．1 茵种来源 样品为中石化大连石油分公 放废水中的主要有害污染物．含酚废水主要来源 司污水处理站的活性污泥． 于制药、炼焦、石油精炼、塑料等行业[1]．苯酚对水 1．1．2培养基 生生物具有很强的毒害作用，危害人类的神经，已 0．000 被美国环保署列入优先控制污染物和65种有毒 KH2P042，Na2HP041．3，FeCl3 25；去离 污染物的黑名单中[2]． 000 子水1 mL；按实际需要加入相应浓度的苯酚 处理含酚废水的方法很多，其中生物降解法 和其他碳源． 是一种经济有效且无二次污染的方法，许多学者 (2)LB培养基(g／L)：牛肉膏5，蛋白胨10， 在这方面进行了大量研究．近年来从酚污染的环 000 氯化钠10；去离子水1 7．0．固体培 mL．pH 境中分离到多种降解苯酚的微生物菌种，主要包 养基另加入20g／L琼脂． 括蜡状芽孢杆菌属(Bacilluscereus)、醋酸钙不动 (3)分离纯化培养基：无机盐培养基中加入 20 杆菌(Acinetobacterc口zfo口f以ic“5)、恶臭假单胞菌g／L琼脂． (Pseudomonas putida)‘3～53等． 1．2实验方法 本文从中石化大连石油分公司污