PSTI1可提高大肠杆菌应答胁迫能力.pdfVIP

第28卷第4期 ’ 深圳大学学报理工版 、U28No．4 JOURNAl。0FSHENZHENUNlVERS兀TYSCIENCEANDENGINEERTNG 201l 2011年7月 Julv 文章编号：1000-2618(加11)04．0347-09 【生物工程】 PSTll可提高大肠杆菌应答胁迫能力 刘士德，陈汗英，张建华，田生礼，李水明，李慧丽，李明华，邢 苗 深圳大学生命科学学院，深圳市微生物基因工程重点实验室，深圳518060 摘 dueible 对原核生物胁迫应答功能的影响，观察表达PSrllll的大肠杆菌(西c^eric^施co圮EcoZi)与原菌株的增殖差 异，发现PSrlll表达茵耐受盐、渗透压、重金属离子、氧化、缺氧和酸碱变化胁迫的能力均增强，但对高 温敏感．PSⅡ1保守结构域TPRl能提高EcD屁耐受渗透压胁迫的能力，但TPR2会使层．co尻对盐和渗透压 术检测了与Ps皿1作用的Eco“蛋白，发现嘟11能与E 关键词：微生物细胞生物学；多头绒泡茵；SⅡ1类似蛋白；cDNA文库；大肠杆菌；胁迫应答；真茵； 基因工程；基因编码 256 文献标识码：A 中图分类号：Q932；Q 真核生物普遍存在的胁迫诱导蛋白(s眦ss．in-dipeptiderepeats domain)结构蛋白，但尚未发现含有 ducible 典型，IPR结构域的S111蛋白． pmtein一1，S1r11)是一类进化保守的、调节 细胞胁迫应答的分子伴侣蛋白．S，n1家族成员的共 多头绒泡菌(鼬声orMmPoZ”印^口ZMm)是一种 同特征是都含有2个以上的34肽重复序列结构域介于原核和真核生物之间的过渡态真核生物，具有 (tetratricopeptiderepeatdomian，，IPR)，11PR由3个最基本的胁迫应答机能．当环境不利时，多头绒泡 含有螺旋一转角一螺旋二级结构、序列长度为34 菌以孢子形式生存；当环境条件适宜时，则以原质 氨基酸(aminoacid，姐)的重复序列构成…．细团形式繁殖．多头绒泡菌蛋白质大多只具备真核生 胞在应答热胁迫时，srllIl通过TPR结构与热休克物蛋白质最基本的结构和功能，研究多头绒泡菌 shock 蛋白(heatprotein，Hsp)Hsp70和Hsp90作跚1蛋白的功能有助于了解生物最基本的胁迫应答 用旧J，调节Hsp70和Hsp90的构像及其三磷酸腺苷机制．本课题组在前期研究中，以多头绒泡菌14— 酶(adenosinetriphosphata鸵，ATP鹊e)活性¨…， 交，从多头绒泡菌cDNA文库¨列中分离出一个由 指导Hsp70和Hsp90与其配体蛋白作用H刁j，参与 696碱基对(base Hsp90对配体蛋白生物活性的调节【4，6刁J．此外， S11l还通过Hsp复合体调节蛋白折叠和变性蛋白的cDNA片段．本研究通过5’一端cDNA快速扩增技术 重折叠∞’8引，调节细胞的胁迫应答，影响细胞的生 ofcDNA (mpid舢plification 长、分化和繁殖‘2，6叫0J．H哪删ez等[111分析了多该基因的完整cDNA，并检测了表达该蛋白的大肠 种细菌编码蛋白发现，原核生物存在含非典型11PR杆菌(Esc．7ler如^缸co屁，Eco尻)对不同胁迫作用的 followed 结构域的口R—DP(TPRby酗paratate—pmline 应答反应；通过puu—do蛐和质谱分析技术，检测 收稿日期：20ll—Ol一25；修回日期：20ll—04一07