产胞外黑色素海洋菌的鉴定及发酵条件优化.pdfVIP

第３３卷　第２期 应 用 海 洋 学 学 报 Ｖｏｌ３３，Ｎｏ２ 　２０１４年５ 月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｏｃｅａｎｏｇｒａｐｈｙ Ｍａｙ，２０１４ 产胞外黑色素海洋菌的鉴定及发酵条件优化 田欣欣 ，王　琛 ，曹　为 ，曲凌云１ ２ １ １ （１．国家海洋局海洋生态环境科学与工程重点实验室、国家海洋局第一海洋研究所，山东 青岛２６６０６１； ２．烟台大学生命科学学院，山东 烟台２６４００５） 从山东近海海域沉积物的微生物筛选中获得了一株高产胞外黑色素的菌株 ＱＪＮＹ８２，通过对 摘要： 该菌株菌落形态特征观察、生理生化检验及 １６Ｓ ｒＤＮＡ序列测定，初步确定该菌株为发光杆菌属细 菌．通过对菌株ＱＪＮＹ８２ 的胞外产物进行红外光谱分析，得到该细菌的胞外产物为黑色素，纯化后 的黑色素的红外光谱图与标准黑色素（ＳＩＧＭＡ）的红外光谱图一致，且该细菌所产黑色素的理化性 质与标准黑色素具有一致性．该海洋菌株具有产黑色素速度快，产量高且不需要 Ｌ酪氨酸诱导的 特点，而且经Ｌ酪氨酸诱导后，可显著提高菌株ＱＪＮＹ８２ 胞外黑色素的产量，在Ｌ酪氨酸的含量为 ０７５ ｇ／ｄｍ 、盐度为３０、ｐＨ值为８０、温度为２８℃ 的条件下，菌株黑色素产量是未加 Ｌ酪氨酸的３ ３５ 倍，其产量达１３２５ｇ／ｄｍ ．鉴于菌株ＱＪＮＹ８２ 具有产黑色素的特性，将成为发光杆菌属的一个３ 新的菌种资源． 海洋生物学；黑色素；１６Ｓ ｒＤＮＡ；发光杆菌属；发酵条件优化 关键词： ＤＯＩ：１０３９６９／Ｊ．ＩＳＳＮ．２０９５４９７２２０１４０２０１９ 中图分类号：Ｐ７３５ 文献标识码：Ｂ 文章编号：２０９５４９７２（２０１４）０２０２９００７ 　　黑色素是一种大量存在于动植物和微生物中的 虽然黑色素对生物生长、发育不是不可或缺的， ［１］ ［６］ 非均质的类多酚聚合体 ．对生物体来讲，黑色素 但是可以提高其生存与竞争能力 ．黑色素有广泛 对地球上变化的条件有着较为神秘的适应性．微生 的应用潜力，比如可以在化妆品和染发剂中起装饰 物产生的黑色素可分为胞内黑色素和胞外黑色素两 作用，防护紫外线辐射，清除自由基，作为无定形的 大类．Ｎｉｃｏｌａｕｓ（１９６８）等人提出，由于化学结构的差 半导体，以及在光保护剂和生物杀虫剂的生产方面 异黑色素被分为３ 类：真黑素（ｅｕｍｅｌａｎｉｎｓ）、棕黑素 ［７］ 都有应用 ．另外，化学合成的黑色素安全性不高， （ ［２］ ｐｈａｅｏｍｅｌａｎｉｎｓ）、异黑素（ａｌｌｏｍｅｌａｎｉｎｓ） ．黑色素 而从动植物体内提取的黑色素因生产过程繁琐，成 通常不溶于水、酸溶液和普通有机溶剂，可溶于碱溶 本较高等缺点而无法进行大规模生产，利用微生物 ［３］ 液 ．在某些情况下，黑色素与蛋白质或者糖类结 生产黑色素具有资源丰富、工艺流程简单、产量高的 ［４］ 优势，因此研究微生物发酵生产黑色素，并对其进行 合，会导致黑色素具有一定的水溶性 ．黑色素有 许多重要的生物学方面的功能：其一是因为蛋白质 开发利用，具有很大的优势，并越来越得到广泛的 的交联而起到强化结构的功能；其二是黑色素形成 重视［８１０］． 过程具有进化上的保守性，特别是如巯基（·ＳＨ）和 本研究以一株高产胞外黑色素的海洋菌株 氨基（·