响应面法优化秃疮花中生物碱提取工艺及抑菌活性研究.pdfVIP

206—214 草业学垠 第21卷第4期 2012年8月 ACTAPRATACULTURAESINICA V01．21，No．4 响应面法优化秃疮花中生物碱提取 工艺及抑茵活性研究 赵强1，余四九1，王廷璞弘，袁毅君2 (1．甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰卅I730070；2．天水师范学院生命科学与化学学院，甘肃天水741001) 摘要：以秃疮花为研究对象，在单因素水平测定的基础上，通过响应面法优化其提取工艺，并使用响应面法提取浓 缩液进行抑菌活性测定，以大肠埃希氏杆菌为研究对象，进行透射电镜观察。结果显示，秃疮花生物碱最佳提取工 艺条件为：液料比15mL／g、超声时间35rain、回流时间2．5h、乙醇浓度65％，在此工艺下秃疮花生物碱含量为 9．33％；其响应面法提取浓缩液对大肠埃希氏杆菌、白色念珠菌、绿脓杆菌的最小抑菌浓度分别为0．20，0．15和 0．35 mg／mL，最低杀菌浓度分别为0．15，0．10和0．30mg／mL；在透射电镜下观察到对大肠埃希氏杆菌抑制效果 显著。表明响应面法对秃疮花生物碱提取工艺的优化比较合理。 关键词：响应面法；秃疮花；生物碱；抑菌 中图分类号：Q946．88文献标识码：A 文章编号：1004—5759(2012)04—0206—09 秃疮花(Dicranostigma 1300 m以上的高原、山坡、丘陵、路旁等处。在甘肃省陇南、天水、平凉等地的渭水流域、秦岭南北均有广泛的分 布。该植株味苦、涩，性凉，可入药，有抗炎、抑菌、消肿止痛、清热解毒等功效口]。研究表明，由于秃疮花含有多种 异喹啉类生物碱，所以其表现出具有多种生物学活性心]。将该生物碱临床用于结核病和窦道溃疡症，其总有效率 可达90％以上，还具有提高心肌细胞功能、提高机体免疫力、保护受损肝细胞、抗溶血等药理学活性，且安全无毒 副作用‘3。6I。 近年来，学者对秃疮花的研究日渐深入。陈荃等口1采取石蜡切片法和光学显微镜技术，对秃疮花营养器官进 行显微结构观察，进一步了解了其微观结构特点，为该植物的人工驯化和科学栽培提供了基础依据；赵强等[8]、王 廷璞等[93先后利用指纹识别和波层色谱检测技术，发现秃疮花中含有5种主要生物碱成分，其中异紫堇碱含量较 高；董晓宁等[1…、赵强等凹3将秃疮花经石英色谱柱层析的提取物，作用于大肠埃希氏杆菌和金黄色葡萄球菌，发 现其具有一定的抑菌效果，其对超氧自由基和羟基自由基也有一定的清除作用；刘大护等[1门利用普通硅胶柱色 谱对秃疮花的生物碱类化学成分进行提取、分离和纯化，并利用超导核磁共振等现代光谱和波谱技术鉴定化合物 的结构，从秃疮花中发现11个异喹啉类生物碱，其中2个萘菲啶类、1个吗啡烷类、4个阿扑菲类和4个普罗托品 类生物碱化合物；巩江等[12]对珍稀中药秃疮花进行了药学研究，发现秃疮花的生物碱在抗菌、抗肿瘤、肝保护等 方面有很强的药学活性，其具有很好的经济价值和市场开发前景；赵强等[1叼采用酸性染料比色法，以异紫堇碱标 准品为对照，对秃疮花中总生物碱含量进行了测定，从而建立了秃疮花中总生物碱含量的检测方法，为该药材的 质量控制和评价提供了科学依据；李岩等[1妇利用国际通用DNA条形码技术，对新疆伊犁地区秃疮花基因条形码 及系统发生关系进行了初步研究，测序获得的rbcL和matK基因序列长度分别为539和700bp，用最大简约法 特征做了研究，发现其对Cd和Zn具有较强的耐性和富集能力，对Cu和Pb具有较弱的耐性和富集能力。 01—18 收稿日期：2011—11—24；改回日期：201z 2010 基金项目：2010年人社部出国留学人员基金项目“红茂草生物碱临床抗炎机制与毒理研究”和甘肃省中医药管理局基金项目(GZK20)资 助。 作者简介：赵强(1982一)，男，甘肃天水人，在读博士。E—mail：zhaoq2000@163．com *通讯作者。Email：wangtp0