Wnt5a和β-Catenin在口腔鳞状细胞癌中表达及与临床病理学因素相关性研究.pdf

i n在口腔鳞状细胞癌中的表达 WntSa幂g口-Oaten 及与临床病理学因素的相关性研究 硕士研究生：李晓明 指导教师：朱恩新 教授 专业名称：口腔基础医学 摘 要 Wnt家族是调节细胞生长发育、分化和增殖的重要信号分子，在肿 瘤的发生发展过程中起着重要的调节作用。Wnt家族成员作为分泌性蛋 发生发展密切相关，而B—Catenin作为此通路的中心调节蛋白，其胞 内积聚及胞核转运是肿瘤发生的重要环节。Wnt信号分子被激活后，Wnt 蛋白与受体结合，活化细胞内蛋DSH，抑制了由GSK一3B 糖原合成 激酶3 的降解复合物活性，使B—Catenin的降解减少，在胞内积累并转移至 核内，与转录因子TCF／LEF T细胞因子／淋巴样增强因子 结合，并在 其他因子的辅助下，协调靶基因转录。在肿瘤发生过程中，Wnt经典通 路上游的任何一个组分发生变异 mutation ，其共同的结果就是引 起过量的D—Catenin胞浆积聚及胞核转运，并诱导其下游靶基因 D1、CD44、姗P一7等与肿瘤发生相关的基因进行转录。 C-MYC、Cyclin 因此，大部分的Wnt信号分子被认为是癌基因。 ·1。 而激活下游的靶基因转录，此通路与肿瘤的发生、发展、侵袭和转移 密切相关。最新的研究成果还表明Wnt5a可能通过非经典钙通路及其他 机制抑制wnt／B—Catenin通路，在肿瘤的发生发展中起抑癌基因的作 用。 目前有关Wnt通路与口腔鳞状细胞癌的临床病理研究报道尚且少 Wnt5a在人类口腔鳞状细胞癌的表达及与临床病理因素相关性的研究 未见报导。因而，本研究的目的之一是探讨在口腔鳞状细胞癌中Wnt5a 和0一Catenin的蛋白表达水平及分布与口腔鳞癌的组织分化程度及临 关联。 本研究中，在41例口腔鳞癌的石蜡包埋组织中，使用链激酶一生物 达水平和分布 ～抗分别使用羊抗人多克隆Wnt5a抗体，美国RD公司、 化表达结果由每张切片中阳性细胞的百分数按照半■量法计算获得， Spearman相关性检验，进行统计学处理。 实验结果表明在41例口腔鳞癌中，WntSa阳性表达为40例 相对强11例，两种蛋白表达水平具有负相关的病例总计为26例 63．4％ 。统计学结果显示Wnt5a表达水平与肿瘤的分化程度呈正相 显的相关性 p O．05 。两种蛋白的表达水平与性别、年龄、大小无 ·2’ 关。 这些结果证实，Wnt经典通路在口腔鳞癌发生发展中起调节作用。 随着肿瘤分化越低，B—Catenin的胞膜表达减少，胞浆表达增加。而 且，在口腔鳞状细胞癌癌巢的浸润前沿中，B-Catenin的细胞膜的表 达明显下降，说明浸润前沿细胞丧失了正常的细胞间黏附连接而具有 更强的侵袭性。我们还发现，Wnt5a蛋白表达水平与分化程度之间存在 着正相关关系，在高分化肿瘤中，存在着Wnt5a蛋白的过度表达，而随 着分化程度降低，Wnt5a表达水平随之下降。这提示了在肿瘤发生早期 Wnt5a可能因反馈作用而过量合成和分泌，仍可发挥其抑癌基因的作 用，随着肿瘤细胞的分化程度降低与恶性程度升高，而丧失了细胞分 泌Wnt5a蛋白的作用，从而丧失了Wnt5a的抑癌作用。在实验中我们发 个预测指标，这与我们的结果相似，Takahashi M等在结肠癌的研究中 研究发现Wnt5a激活的钙通路在人类恶性黑色素瘤的侵袭转移中起重 要作用，而在我们研究的口腔鳞癌样本中未发现Wnt5a的表达与淋巴结 转移的关系，这可能是由于恶性黑色素瘤具有独特的组织病理表现和 临床侵袭方式。在免疫组化染色结果中，我们虽然发现两种蛋白表达 水平在某些病例之间存在负相关，但统计学结果未发现二者之间的明 显相关性，说明可能在肿瘤的发生发展中， WntSa蛋白的表达和B —Catenin的胞浆积聚各有其参与机制，并不一定存在明显的抑制关系。 胞上有明显表达，在部分炎症细胞还可见至UWnt5a的过度表达，这说明 Wnt通路可能对新生血管生成和炎症细胞的趋向性具有调节作用，因而 影响肿瘤的预后和治疗，其作用机制尚需进一步探讨和研究。 巴转移具有相关性，而Wnt／Ca“非经典通路的最重要的上游基因WntSa 的蛋白表达水平与口腔鳞癌的分化程度有关，这提示TWnt信号通路的 ·3‘ 组分可能作为口腔鳞癌发生发展和预后的诊断指标。 B～Catenin蛋白 关键词：口腔鳞状细胞癌 WntSa蛋白 免疫组织化学法 ·4’ Immunohistochemicalof Wnt5a Analysis and in j3-Catenin Oral Cell with Squamous Features Clinico—pathological Li Postg