可溶型HLAG在试管婴儿技术中的研究进展_临床医学论文.docVIP

可溶型HLA在试管婴儿技术中的研究进展_临床医学论文 可溶型HLA在试管婴儿技术中的研究进展_临床医学论文 作者：廖爱华, 张玲, 王燕, 丁文萍 【关键词】 人类白细胞抗原G 胚胎 植入 体外授精技术 　　胚胎的成功植入是人类生殖最关键的因素。在过去10年里, 尽管试管婴儿（in vitro fertilization, IVF）技术取得长足地发展, 但植入率低的问题一直无明显改善。70%以上的移植胚胎未能成功植入, 仅14%移植的胚胎最终能产生后代。为了增加妊娠率, 一些医疗工作者冒着多胎妊娠的危险, 选择移植多个胚胎。在增加妊娠率和减少多胎妊娠危险的问题上, 常常令IVF实施者面临两难的困境。目前, 国内外对限制IVF后多胎妊娠的发生达到一致共识, 以尽量减少母儿死亡率。为了达到该目的, 有必要识别具有最大潜能发育成健康胎儿的单个胚胎, 这样才能达到移植1个胚胎而不减少妊娠率的理想目标。现采用形态学、 生化学和遗传学标准综合评价移植前胚胎的健康。理想的方法是通过分析不经染色的胚胎图像或培养胚胎上清微滴等非创伤性方法来进行评价。近期的一些研究表明IVF胚胎培养上清中可溶型人类白细胞抗原G（soluble human leukocyte antigen G, sHLA）是评价胚胎发育潜能的新标志物, 能被用来预测IVF治疗后成功妊娠的结局。现就sHLA在IVF中的研究现状及进展作一综述。 　　1 移植前胚胎质量的评价与发育潜能的预测 　　目前移植前胚胎的选择通常是根据胚胎形态和分裂时期来进行。尽管形态学评价能增进移植优质胚胎的选择, 但它在预测单个胚胎植入潜能方面有严重的局限性, 因胚胎活力及发育潜能并不与胚胎质量严格相关[1]。研究还表明形态学评分低的胚胎常表现为染色体异常或非整倍体。用囊胚活检进行荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization, FISH）来识别是否存在非整倍体胚胎的方法也有局限性[2], 因目前可用于FISH分析的商品化探针仅针对8对或9对染色体, 而剩下的14对染色体尚无相应的探针[3]。因此, 在过去10年里, 尽管评价胚胎形态和识别植入前卵裂期胚胎非整倍染色体的方法得到明显改进, 但IVF治疗后的植入率并未增加。此外, 早期和近期的研究还报道了几种分子在调节植入前胚胎发育过程中的重要性。然而, 除Roudebush等[4]提出血小板激活因子（plateletctor, PAF）可作为评价胚胎活力的指标外, 没有一种分子常规应用于选择胚胎移植的临床工作中。PAF被认为可作为胚胎选择的标志物, 因为人类胚胎产生的PAF似乎与妊娠结局相关。但它仍未被常规应用。 　　sHLA是一种非经典人类白细胞抗原I类（HLA）抗原, 被认为是评价胚胎发育潜能的新标志物。Jurisicova等[5]首次报道该标志物的发现: 即人类胚胎上存在sHLA及其蛋白。Menicucci等[6]从IVF技术获得的人类早期胚胎的培养上清液中证实了sHLA分子的存在,且表明sHLA是维持妊娠不可缺少的。Fuzzi等[7]从101例接受IVF治疗对象的观察结果中发现, 只有在移植当日胚胎培养上清液中检测到sHLA的对象, 才能获得临床妊娠。 　　2 HLA的特异性和功能 　　HLA有别于经典HLA类分子的不同之处主要在于: （1）有限的分子多态性。目前发现HLA仅有7种异构体分子, 其中4种为膜结合型（HLA、 、 和）, 3种为可溶型（HLA、 和）。（2）较严格的组织表达限制性。HLA主要在绒毛外滋养层细胞强表达[8], 此外, 还在植入前的囊胚、 甲状腺、 角膜、 红细胞以及血细胞表达; sHLA分子在血浆和其他体液如羊膜腔液中也表达[9, 10]。近期研究表明在IVF的胚胎培养液中可检测到sHLA分子。 　　HLA的表达能使细胞免于自然杀伤（natural killer, NK）细胞对其的杀伤, 且能下调Th1/Th2细胞因子的比例, 因此在胚胎植入过程和诱导胚胎异体移植耐受方面起着重要作用, 被认为是妊娠过程中重要的免疫耐受分子。除了全长HLA分子具有对NK细胞杀伤抑制作用外, 膜结合型HLA异构体、 、 及可溶型HLA异构体同样可抑制NK细胞的杀伤作用。胚胎植入如同组织移植, 表达sHLA的胚胎才能豁免排斥。 　　3 体外胚胎培养上清液中sHLA与胚胎发育和IVF治疗结局的关系 　　迄今为止, 6个独立的课题组评价了HLA分子在辅助生殖技术（assisted reproductive technology, ART）植入胚胎培养液中表达的重要性。4组观察到胚胎培养液中sHLA分子的存在与ART治疗后高妊娠率密切相关[3, 11, 12]。另外2组未能在胚胎培养上清液中检