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激光共聚焦扫描显微镜 激光共聚焦扫描显微系统 显微观察方式 全光谱激光共聚焦显微扫描系统 OLYMPUS FV1000S 　　激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope LSCM)是20世纪80年代发展起来的一项具有划时代意义的高科技新产品，是当今世界最先进的细胞生物学分析仪器。激光共聚焦显微镜利用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦的原理和装置，以及通过针孔的选择和PMT的收集，并带有一套对其所观察到的对象进行数字图像分析处理的系统软件。与传统光学显微镜相比，它具有更高的分辨率，实现多重荧光的同时观察并可形成清晰的三维图象等优点。所以它问世以来在生物学的研究领域中得到了广泛应用。 　　激光共聚焦显微镜是一种高级的荧光显微镜，其在高分子化学材料方面已经有了非常广泛的应用。聚合物多组份体系的研究已发展成为高分子材料科学的重要领域，而其材料性能又与体系中各组份的相容性及相态结构密切相关。目前，研究多组份聚合物共混体系形态结构最常用的方法有电子显微技术，如扫描电镜法 (SEM)和透射电镜法 (TEM)、X-射线光电子能谱法 (XPS)、原子力显微镜法(AFM)、直接无辐射能量转移法(DET)等，这些方法中有的可以从分子水平上获得共混体系中各组份相互作用或形态结构的信息，但也各自存在一些局限性，如有的方法对样品的要求较为苛刻，制样比较复杂，而更主要的是它们或为表面分析方法，只能给出表面结构的信息；或者只能获得宏观平均结构图象，如果要了解材料的层次形态结构及其分布，就要破坏样品，XPS虽可以给出表面以下的组成分布，但只能提供约100A厚度以内的信息。　　激光共聚焦荧光显微技术是一种无损的多层形态观测的新方法，它提供了有效的途径弥补上述各种手段的不足之处。其检测深度可达100μm，制样简单、快速、图象直观。由于它是光学观察方法，因此其分辨率较电镜为低，约0.2μm 。另外，为了得到一定的反差，进行观察前，需对多组份聚合物体系中的某一（或某些）组份进行荧光标记。可得到比普通荧光显微镜更高分辨率、更高灵敏度的图像，并有效地保护标本。不仅在X-Y平面，同时在Z轴方向，可获得样品不同深度层面的信息，即光学切片或断层扫描，而无需破坏样品。另外，获得的图像信息通过相关软件的帮助，可对标本各深度层面的信息进行三维重建，可以得到表面及内部结构都非常清晰的三维图像。因此，在生物学、医学、高分子材料、生物化学、胶体化学（如研究胶体分散相中乳胶颗粒的分布、排列、热运动及器壁效应等）等众多研究领域，激光共聚焦技术都有着广泛的应用。 ? 激光共聚焦扫描显微系统实验结果 激光共聚焦扫描显微系统实验结果 激光共聚焦扫描显微系统实验结果 激光共聚焦扫描显微系统实验结果 设备简介： 　　处于世界领先地位的奥林巴斯 FluoView? FV1000 共聚焦显微镜，是为适应当今生物科研趋势而推出的新型的点扫描、点探测共聚焦显微镜，作为最新一代的活细胞成像工作站， FV1000 给 21 世纪的生物科研工作带来一系列尖端的前沿应用科技，为科研最前线的研究者提供先进易用的平台。 　　在FV1000各种功能当中，应用两束激光进行刺激和扫描成像同步的双扫系统（SIM Scanner）可以说最为瞩目。应用高效离子沉积镀膜技术的滤光片，增加了系统的灵敏度，同时高速的扫描振镜与光谱分光检测装置的结合，使光谱成像的分辨率可以精确到 2nm 。 　　FV1000 扫描单元提供高敏感度的检测系统，并且带有高速扫描和激光反馈电路，在观察活体标本，尤其是观察快速的生理动态变化时， FV1000 仍然能获取最好质量的图像。图像的扫描可以选择各种分辨率，最高达到 4096×4096 ，每个通道 4096 个灰度级（ 12-bit ），确保能够观察到最细微的图像细节。 FV1000 扫描单元应用新的光谱成像技术，利用光栅分光技术提供目前世界上最精确的光谱分辨率。 　　与传统光学显微镜相比，激光共聚焦显微镜具有更高的分辨率，实现多重荧光的同时观察并可形成清晰的三维图象等优点，在对生物样品的观察中，激光共聚焦显微镜有如下优越性： 1、对活细胞和组织或细胞切片进行连续扫描，可获得精细的细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统的三维图像。 2、可以得到比普通荧光显微镜更高对比度、高解析度图象、同时具有高灵敏度、杰出样品保护。 3、多维图象的获得，如7 维图象(XYZaλIt): xyt 、xzt 和xt 扫描,时间序列扫描旋转扫描、区域扫描、光谱扫描、同时方便进行图像处理。4、细胞内离子荧光标记，单标记或多标记，检测细胞内如PH和钠、钙、镁等离子浓度的比率测定及动态变化。 5、荧光标记探头标记的活细胞或切片标本的活细胞生物物质，膜标记、免疫物质、