蛋白质-壳聚糖复合物的特性分析.pdfVIP

2010生物颗粒与粉体制备、应用技术研讨会 蛋白质一壳聚糖复合物的特性分析 宁辉英国马尔文仪器有限公司 关键词：动态光散射；Zeta电位；粒径；蛋白质．壳聚糖复合物；药物载体 1． 引言 壳聚糖(CS)是一种链状可生物降解的聚糖，最近得到了广泛研究，用作药用蛋白质或 基因导入的载体。加入三聚磷酸盐(TPP)作为交联剂，壳聚糖将根据CS的分子量形成直 物载体的容量和效率，而且取决于试剂的浓度以及pH和温度等环境条件[1．3]。本项工作 zeta电位进行了研究。 2．材料与方法 pH值约为3的乙酸水溶液中，其浓度固定在lmg／ml。搅拌溶液l小时。通过将不同数量的 交联剂TPP加入CS溶液，制备不含蛋白质的复合物，形成不同大小的纳米粒。通过先将 的复合物。这样，Harpin蛋白质就融入了CS壳。通过NaOH溶液来调节pH值。 3．结果与讨论 CS．TPP复合物 这说明卟m2基团的质子化作用决 在测定的4．8N6．3的pH范围中，颗粒的zeta电位为正， 定了表面电荷。所测得的zeta电位随着pH值的增大而降低，说明与CS／TPP的比值无关。 zeta电位随pH值增大而降低，这是CS中氨基基团的质子化程度的降低而造成的。粒径随 着pH值的增大而增大可能是由于粒子的聚集以及单个颗粒在初始形成后并未增大所造 成的[31。zeta电位随pH值的增大而降低的趋势验证了这一假设，这样一来，减少了颗粒 之间的静电斥力，并使聚集状态比分散状态更加稳定。 2010生物颗粒与粉体制备、应用技术研讨会 CS—TPP-Harpin复合物 加而降低，而复合物粒径则有所增大。zeta电位的降低可以解释为CS表面的正电荷被带 负电的Harpin蛋白质所中和。所添加的Harpin蛋白质越多，复合物表面的正电荷就越少， zeta电位也就越低。粒径的增大可能是zeta电位降低、颗粒聚集的结果。 改变CS／TPP的比例会同时影响粒径和zeta电位，如图2所示。随着CS厂rPP比的增 E 、 i C 旦 o A 旦 o N 颗粒粒径会减小，而颗粒的zeta电位会增大。TPP带负电，作为交联剂，连结CS链形 比值变化的增大可以解释为是由颗粒表面正电荷数量的增加所造成的。粒径随CS／TPP 比值的增大而减小可能是由于两个因素。一个因素是当CS肿P比值较低，TPP含量较 高时，TPP不仅作为粒子内的交联剂，还作为粒子间的交联剂。这可能会形成大的聚集 体。另一项原因可能是当CS／TPP比值较低时，zeta电位相对较低，降低了分散体系的 稳定性。 2010生物颗粒与粉体制备、应用技术研讨会 浓度为0．1mg／ml。 4．结论 颗粒的粒径和zeta电位进行了测定。所测定的复合物在研究的测定条件下表面带有正电 值的影响。pH值通过改变控制CS表面氨基基团和羟基基团电荷的化学平衡来影响电荷和 相对数量对表面电荷起到中和作用，因此降低zeta电位。所测体系的粒径始终随着zeta电 位的降低而增大。较大的粒径可能源自于由于颗粒间静电斥力的降低而造成的颗粒与颗 粒聚集体的形成。 在本项研究中，我们表明CS．TPP复合物的粒径和表面电荷可以通过控制添加剂的加入以 及环境参数来控制。这将成为未来药物释控研究所要关注的问题。 参考文献 15，354-361． 14，l一14． [2】M．George，T．E．Abraham(2006)药物释控杂志1