三氯乙烯药疹样皮炎细胞免疫学指标及发病机制研究学士本科毕业论文.docVIP

目 录 中文摘要 1 英文摘要 6 英文缩写词表 12 前 言 14 第一部分 TCE药疹样皮炎细胞免疫学指标及发病机制研究 19 第一节 TCE药疹样皮炎患者外周血淋巴细胞抗原特异性增殖功能测定 21 第二节 TCE药疹样皮炎患者外周血免疫细胞检测分析 26 第三节 Fas/FasL与PF/GrB介导的TCE免疫毒作用机制探讨 37 小 结 55 第二部分 8例TCE药疹样皮炎患者病例报告分析 56 小 结 71 总 结 72 致 谢 74 参考文献 76 附录1 生物标志物的验证及其在健康危险预警中的作用 86 附录2 个人简历 96 三氯乙烯药疹样皮炎细胞免疫学指标研究职业接触三氯乙烯（TrichloroethyleneTCE）引起的TCE药疹样皮炎是近年来我国职业卫生领域令人关注的问题，但目前关于该病的发病机制不，缺乏特异性治疗。 根据该病的发病特点一般认为其属于Ⅳ型超敏反应的可能性最大，Ⅳ型超敏反应发生的机制与抗体和补体无关，主要是T细胞介导的免疫损伤。T细胞介导的免疫反应发生的过程涉及到记忆性T淋巴细胞的生成和效应性T细胞的活化增殖，效应性T细胞通过分泌一系列细胞因子发挥作用，并调节B细胞、NK细胞以及其他各群免疫细胞的活化增殖。另外，细胞毒性T细胞（CTL）在T细胞介导的超敏反应中发挥重要的作用，其主要通过两条途径杀伤靶细胞，其一是穿孔素-颗粒酶途径，其主要参与免疫防御；其二是Fas-FasL途径，Fas/FasL主要介导活化的效应性细胞凋亡，清除激活的外周CTL，下调免疫应答。这两条途径对于机体对外来抗原进行适度的免疫应答，维持免疫自稳发挥重要作用。正常状态下，特异性淋巴细胞在外周免疫器官接受抗原刺激而大量增殖，在免疫应答末期，机体通过Fas/FasL细胞凋亡机制使发生活化的T细胞凋亡，从而对免疫过程进行严密调控，以维持免疫自稳。因此，TCE药疹样皮炎的的发生可能是由于机体免疫自稳状态被打破，发生过强的免疫应答反应所致。 为验证上述假说，本研究采用设计以及TCE药疹样皮炎入院治疗以及时细胞免疫学指标的比较分析，进一步探讨细胞免疫与TCE药疹样皮炎的关系。研究结果如下： 一、TCE药疹样皮炎研究 本研究选择三组研究对象，病例组TCE药疹样皮炎患者接触对照组TCE作业工人；非接触对照组为从未接触过TCE的工人。三组研究对象按年龄性别进行匹配后，结果如下： 1.淋巴细胞特异性增殖功能谷丙转氨酶（ALT升高93.33%）；谷草转氨酶升高73.33%）。三组研究对象外周血淋巴细胞分别与不同浓度TCE（0.2mmol/L、1 mmol/L、5 mmol/L在各组内随着TCE染毒浓度的增加外周血淋巴细胞的存活率逐渐降低，差异有统计学意义(p0.05)，细胞的存活率组间差异无统计学意义(p0.05)，提示TCE本身具有细胞毒性，而在TCE药疹样皮炎TCE接触对照体内并不存在针对TCE的特异性记忆性淋巴细胞。 血常规结果6例高于正常参考值范围，1例低于正常参考值范围；6例MONO）高于正常参考值范围；14例NEUT）高于正常参考值范围；8例EO）高于正常参考值范围，2例低于正常参考值范围，8例BASO）高于正常参考值范围。在接触对照组和非接触对照组体内上述指标均在正常参考值范围内。比较各组之间淋巴细胞群在外周血中的变化情况。外周血CD4+T细胞高于接触对照组和对照组(p0.05)(p0.05)，提示这三个指标可作为TCE药疹样皮炎的疾病标志； CD8+T细胞CD8+CD28-T细胞病例组接触对照组对照组(p0.05)，CD3-CD56+细胞病例组接触对照组对照组(p0.05)。外周血F/FasL、PF/GrB的测定病例组外周血CD8+细胞高于接触对照组和非接触对照组，差异有统计学意义（p0.05），在接触对照组和非接触对照组之间差异无统计学意义（p0.05）；CD4+T细胞（p0.05）（p0.05）CD8+T细胞病例组接触对照组非接触对照组差异有统计学意义（p0.05）PF蛋白在外周血淋巴细胞中表达高于接触对照与非接触对照组(p0.05)，而在接触对照组与非接触对照组之间无显著性差异(p0.05)。GrB在接触对照组 (p0.05)，病例组和接触对照组间差异无统计学意义(p0.05)。CD8+CTL随血液循环迁移至皮肤、肝脏、肾脏等组织器官，通过与这些组织细胞表面的FAS蛋白结合介导靶细胞的凋亡。同时病例组体内通过活化的CTL高表达PF和GrB蛋白，介导皮肤角质细胞的死亡，引起TCE药疹样皮炎患者皮肤的损伤。而健康的TCE接触对照工人体内也存在活化的细胞毒性T细胞（CD4+CTLCD8+CTL）Fas mRNA表达FASL mRNA表达mRNA表达mRNA表达二、TCE药疹样皮炎