一种金属螯合连续棒色谱柱的制备及色谱性能.pdfVIP

VOl.ZZ 高 等 学 校 化 学 学 报 NO.1O 年 月 Z O O 1 1O CHEMICAL OURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 1664~1666 [研究简报] 一种金属螯合连续棒色谱柱的制备及色谱性能 卫引茂 黄晓冬 耿信笃 西北大学现代分离科学研究所 西安 ( 9 71OO69) 关键词 金属螯合色谱 连续棒色谱柱 生物大分子; ; 中图分类号 O657.7 文献标识码 A 文章编号 OZ51-O79O(ZOO1)1O-1664-O3 金属螯合色谱(IMAC)在生物大分子的分离和纯化中有广泛的应用 通过改变. IMAC 的洗脱条件 和被螯合的金属离子种类9生物大分子可获得选择性分离 目前. 9IMAC 通常以有机和无机微球作固 定相 由于柱死体积的存在 使色谱柱空间利用率低 且降低了蛋白质分离的柱效 近来报道的连续 . 9 9 . [1] 棒色谱柱是由直径 左右的微粒堆积而成的整体 消除了色谱柱的死体积 该类色谱柱用于蛋 1 :m 9 9 [Z] [3] [495] [6] 白的反相 疏水 离子交换 和亲和色谱 分离均可获得高的分离效率 然而 至今尚未见到对 ~ ~ . 9 金属螯合连续棒色谱柱制备及应用的研究报道 对蛋白的 分离机理研究中 研究流动相 对 . IMAC 9 pH 分离的影响是主要手段之一 但通常研究的 值在 的窄范围内 本文提出和制备了以交联 9 pH 5.O~9.O . 聚甲基丙烯酸缩水甘油酯连续棒为基质的金属螯合色谱柱 并研究了 在 的较宽范围内 9 pH Z.O~11.O 对蛋白保留的影响. 1 实验部分 用尺寸为 的不锈钢色谱柱管 按文献 的方法制备交联聚甲基丙烯酸缩水 5O X ( . .) 9 [4] nm mm i d 甘油酯 在. 45 下使 1OO mL 四氢呋喃流过色谱柱以除去可溶性化合物 然后在. O 下用 3O mL 乙 二胺循环通过色谱柱 反应结束后 依次用二氧六环 体积比 二氧六环 水 Z4 . 9 /ZO% (