鲁米诺-铁氰化钾-抗坏血酸化学发光反应的研究与其分析应用.pdfVIP

C一150 应用化学新进展——绿色化学与环境保护 鲁米诺—铁氰化钾一抗坏血酸化学发光反应 的研究及其分析应用 张小燕 (陕西师范大学化学与材料科学学院，西安710062) 己报道的用化学发光法测定抗坏血酸主要是利用它的还原性以及它对化学发光信号的抑制作用建 立的分析方法““。抗坏血酸是一多羟基化合物，其分子中的烯二醇结构使其性质活泼，抗坏血酸水溶 液极不稳定，易被氧化变为脱氢抗坏血酸，而后者在pH7以上受碱的催化作用很快水解为二酮古罗糖 酸盐…。实验发现，在碱性条件下抗坏血酸对鲁米诺．铁氰化钾化学发光体系有强烈的增强作用，依此建 立了测定抗坏血酸的新方法。将抗坏血酸溶液室温露置于空气中，随着放置时间的加长，溶液对鲁米诺 ．铁氰化钾化学发光体系的增强作用没有减弱反而加强。据此在实验的基础上对化学发光机理进行了详 细的研究，认为起增强作用的是抗坏血酸的降解产物L二酮古罗糖酸。 1实验部分 1 1仪器及试剂 量瓶巾，定容，使用前配制，用时逐级稀释；铁氰化钾溶液(1×10-2mol／L)；所用试剂均为分析纯。水 为二次去离子水。 Vc H20 K3Fe(CN)6 luminol 图1实验流路示意图 1 2实验方法 按图1所示流路，以水做载流分别将抗坏血酸溶液与鲁米诺和铁氰化钾溶液通过相应的管道输入分 析系统，以峰高定量。 2结果与讨论 21反应机理 血酸有强还原性，在空气中即易被氧化，因此增敏化学发光的物质可能为：a202与Oi、抗坏血酸、脱 氢抗坏血酸或者二酮古罗糖酸。实验发现，将一抗坏血酸溶液室温露置于空气中，随着放置时间的加长 (考察了48h)，溶液对鲁米诺一铁氰化钾化学发光体系的加强作用没有减弱反而加强，因此不是抗坏血 酸本身在起增敏作用，由于Oi与H202不稳定，我们认为起增敏作用的可能是抗坏血酸的降解产物。为 2003 中国化学会第八届全国应用化学年会 西安 9 了证明以上猜测，作了以下实验： (1)在体系中加入HRP后，化学发光强度没有受到影响； (2)将抗坏血酸溶液置于50。C热水浴中5min，冷却至室温后测量，化学发光强度较未加热的溶液 增强； (3)在抗坏血酸溶液中加入氢氧化钠溶液，发现随着混合时间的加长，化学发光强度逐渐增强； (4)作者根据文献…制得脱氢抗坏血酸溶液，用所制得的脱氢抗坏血酸溶液代替抗坏血酸溶液按 图1所示流路进行试验发现它同样有增敏效果，给脱氢抗坏血酸溶液中加碱使其水解为二酮古罗糖酸 盐，化学发光强度又增强10倍。 基于以上实验事实，认为抗坏血酸增强鲁米诺．铁氰化钾化学发光体系的发光机理为：L．抗坏血酸 被氧化为L脱氢抗坏血酸，L．脱氢抗坏血酸在碱性条件下迅速水解为L-二酮古罗糖酸盐，L．二酮古罗 糖酸盐增强鲁米诺．铁氰化钾化学发光体系。 2．2化学发光反应条件的优化 104mol／L K3Fe(CN)6，0．1mol／LNaOH。 2．3标准曲线、精密度和检出限 X 在上述选定的最佳实验条件下，抗坏血酸的浓度在1×1C一1 104mol／L范围内与发光强度的增强 值成线性关系。为了提高测定的精密度和准确度，校准曲线按抗坏血酸浓度的数量级分段绘制。其回归 按照IUPAC的建议，计算得方法的检出限为5×10一mol／L。 表1校准曲线表 24干扰实验 对l×10。mol几的抗坏血酸溶液进行了干扰实验，结果表明，500倍的果糖、丙酮，200倍的糊精、 淀粉、甘嚣醇、酒石酸，30倍的麦芽糖、草酸，lO倍的葡萄糖、柠檬酸不干扰。 25样品分析 取10片维生素C片剂(标示量：o．19／j日)，准确称量后，研细，混匀，