抗HIV药物小鼠体内免疫调节作用地研究.pdfVIP

中药防治艾滋病论坛 1345 抗HIV药物小鼠体内免疫调节作用的研究 张丽丽1 陈鸿珊2彭宗根1滕立1蒋建东1 1．中国医学科学院中国协和医科大学，北京(10005) 2．医药生物技术研究所，北京(100005) 一、前言 HIV感染者和艾滋病人日益增多，尤其在发展中国家已经成为一个社会问题。尽管全球科学家进 行了长期不懈的努力，但目前尚没有有效预防感染的疫苗，广泛使用的HAART疗法对控制病毒复制 有一定效果，但是仍不能避免耐药株和毒副作用的产生，以致至今尚未能控制HIV的流行。 比值倒置，造成免疫缺陷，这是引起艾滋病发病和各种机会性感染并导致死亡的主要原因，因此在 子配伍，但都未能显现持久的临床效果。中草药及多糖类药物，在提高免疫功能，改善临床症状，抑制病 毒等方面都有很好的作用，并且价格低廉，从其中寻找新的抗HIV药物或活性成分，发展为HAART疗 法的辅助用药已成为当前的一个方向。中草药及多糖类药物的抗HIV的活性较弱，但其综合作用和对 免疫系统的调节是其他药物所不能比拟的，这一特点对于改善患者的免疫状况和生活质量．十分重要。 本文采用流式细胞技术在不同小鼠模型中探讨抗HIV药物和免疫药物在体内的免疫调节作用， 鼠白血病病毒属于逆转录病毒，许多特点都与HIV相似，因此在抗HIV药物的临床前研究中， 曾用于评价核苷类逆转录酶抑制剂AZT的体内药效，以外周血白细胞、红细胞和血小板计数作为评 价指标。小鼠感染鼠白血病病毒后可在发病早期产生以淋巴结病和脾肿大为表现的多克隆淋巴细胞活 化和增殖，之后小鼠就表现为T细胞和B细胞以及吞噬功能缺陷，以及发生增殖性B细胞瘤等疾病。 我们增添了外周血淋巴细胞亚群的检测，以便更确切地评价小鼠感染鼠白血病病毒后免疫系统的变化 情况，以AZT作为治疗药物，研究其对T淋巴细胞亚群的影响。 一般免疫增强剂的研究中常用糖皮质激素、环磷酰胺(CTX)和环孢菌素(CsA)或荷瘤小鼠诱 发免疫抑制的模型、环孢菌素A(CsA)是临床常用的免疫抑制剂，对T细胞，尤其是Th细胞有较 好的选择性抑制作用，而对其他的免疫细胞的抑制作用则相对较弱，这与HIV患者体内CD4水平低 很相似，用CsA导致的小鼠免疫抑制较糖皮质激素和环磷酰胺所致的小鼠免疫抑制能更好地体现抗 HIV药物对CD4细胞的提升作用。免疫调节剂香菇多糖，据报道可使T细胞恢复活性，促进自细胞介 素的产生，还能促进单核巨噬细胞的功能，对HIV的感染也有抑制作用，也有报道它在临床被用于 HIV的免疫调节治疗能影响多种免疫功能，但未见系统的体内实验资料。我国市售香菇多糖注射液作 为免疫调节剂用于治疗乙型肝炎，我们采用了环磷酰胺和环孢菌素致小鼠免疫缺陷模型观察其对小鼠 淋巴细胞亚群的影响。 二、材料和方法 (一)材料 1．药物 注射用环磷酰胺(CYP)：上海华联制药有限公司，批号：021110，用时以生理盐水溶解。山地 1346 中医药发展与人类健康 明环孢素注射液：诺华制药，批号：S15600。 AZT：上海迪赛诺公司产品， 香菇多糖注射液：金陵药业股份有限公司福州梅峰制药厂，批号：030901，用时以生理盐水稀释。 2．病毒株 Datema惠赠。病毒在BALB／C小鼠内传代。 3．动物BALB／C小鼠，6—8周龄，18—20克；中国医学科学院实验动物所提供。 昆明小鼠，雌雄各半，6—8周龄，18—20克；中国医学科学院实验动物中心提供。 CD3 CD4 CD8aTri— 4．试剂荧光抗体：MousePE(T细胞标志)，；MouseFITC，Lot：；Mouse CDl9 color,Lot均为Biolegend公司产品。Mouse CALTAG公司产品。 LysingSolution：BD公司产品，Lot93，Exp：09．05。 Dick．son 5．仪器 流式细胞仪：Becton W舭libur。