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成骨肉瘤血清／尿液代谢组学相关研究 苑福升，杨小玉 吉林大学中日联谊医院 目的本研究旨在通过建立代谢组学实验平台，对照分析动物成骨肉瘤 (，队据os日比Dm以j傩夕实验模型与临床0S、良性骨肿瘤患者的血清／尿液特征代谢 产物，并通过建立O呵代谢谱数学模型，对动物模型及0s患者参比研究，建立 血清、尿液代谢标志物组，并试图从机体的动态代谢途径寻找傩诊断标志物。 方法本研究分3部分进行：建立模型动物O吟的代谢谱。通过建立』l佑．甜(人 成骨肉瘤细胞株)C3H鼠模型和健康对照组，采用氯甲酸乙酯④CF)衍生的气 质联用佑C翻舔夕技术平台，分别观察模型鼠荷瘤后第3、5、7周的内源性小分 子代谢谱相对于健康对照组尿液的变化。用主成分分析伊翻夕的方法，判断荷 瘤鼠同一时间点的尿液样本代谢谱轮廓和趋势，鉴定差异代谢产物中主成分。建 立临床骨肿瘤的代谢谱。将13名傩患者，18名良性肿瘤患者和20名健康对照 人群分成3组，通过ECF衍生GC翻舔技术平台对三组尿液样本代谢进行分析； 同步基于三甲基硅烷fm豁／)衍生的气相色谱飞行时间质谱联用分析 佑鲫0一^舔／)分析的方法，考察三组血清样本。以此分别得到三组血清／尿液 样本的代谢物谱变化，鉴定出代谢产物中比较明显的成分。傩代谢标记物与代 谢通路相关的综合分析。将实验鼠和临床研究的结果予以对比，得出交集的代谢 产物，在A庇缸60Zfc砌扬Ⅵ泡y以及玉ZGG数据库进行代谢通路的查询。通过综合 分析，获得0S在发生发展过程中内源性小分子比较明显的代谢变化，推测傩 代谢诊断标记物、主要代谢通路以及影响其代谢通路的关键酶。 结果1．实验中发现伴随着傩的形成与进展，鼠代谢轮廓在实验第3周开始出 现偏移、第5周已经初步显现分离趋势，第7周已经完全可以区分。可找出的与 傩形成相关的37个差异代谢物，并利用姗丁谱库等数据库，鉴定了其中10 个代谢物。2．利用非监督的尸C么方法，得到健康对照组与骨肿瘤患者代谢谱的 分离趋势。进一步观察到傩、良性骨肿瘤患者与正常对照之间的代谢轮廓的差 异，得到与傩临床病理相关的代谢通路的变化。3．发现oS代谢产物的主要共 同通路异常为肿瘤能量代谢异常和鸟氨酸循环．多胺代谢的异常。在傩尿液代谢 组学研究中，柠檬酸、马尿酸盐、腐胺、亚精胺，鸟氨酸可能成为代谢诊断的标 志物，关键酶推测是鸟氨酸脱羧酶∞Da，谷胱甘肽．S．转移酶矧丁／)的同工 酶和GS办刎、GS刚。傩血清代谢组学研究结果显示，苹果酸、十二烷酸、羊 毛硫氨酸、有可能成为代谢诊断的标志物，推测的关键酶是鸟氨酸循环中负责调 控／转运N．乙酰谷氨酸合酶门似G么影和鸟氨酸转移酶∞C¨。4．代谢差异结果 表明：傩对能量代谢、鸟氨酸循环一多胺代谢等多个生理系统产生显著影响，并 且可能直接导致代谢通路损伤。 结论1．基于ECF和m舔衍生的G渊的傩代谢组学实验平台，进行傩动 物模型和临床傩患者的血／尿液的代谢组学研究，能够初步得到组别代谢轮廓的 分离趋势，表明基于色谱／质谱的尿样代谢组学方法在傩的早期诊断上有很大的 潜力。2．本实验证明：能量代谢异常和鸟氨酸循环．多胺代谢等代谢通路碍在傩 发生、发展病理过程中具有重要作用，与傩形成、恶化和转移具有重要相关性。 关键词：成骨肉瘤；代谢组学；尿液；血清；气相质谱联用；气相色谱飞行时间 质谱联用 MetabonomicsOfosteosarcOma Serum／Urinary study Yuan如sheng，Yrangxiaoyu Jilin Union Univers埘ChinaJapan Hospital objective： This is to themetabonomicstest studydesignedle锄t11rough platfom，analyze animalmodelswith coIltrol urine the healthy group specimens饥∞ugheXperiments， and researchint