亲与毛细管电泳研究不同醇对萘普生与β-环糊精结合常数的影响.pdfVIP

A63 亲和毛细管电泳研究不同醇对萘普生和 B一环糊精结合常数的影响 卫伟鞠幌先‘ (南京大学化学系，南京210093) 摘要：用毛细管亲和电泳研究了不同醇存在时萘普生与D一环糊精的结合常数． 直链醇存在时随着碳链的增长，萘普生与B一环糊精的结合常数逐渐减小．简单 支链醇有同样规律。 关键词：亲和电泳；结合常数；醇；萘普生；p一环糊精 环糊精是环状低聚糖的总称，其分子由六、七或八个葡萄糖单元以1。4一糖苷键结合而 成，分别称为a一、B一、Y一环糊精l】l。它们的分子形状都是成锥形的囿环，具有亲水性的 外壳和憎水性的内腔，能与许多有机和无机化台物形成包接配合物。此外环糊精还可增加药 物的溶解性、稳定性，提高其生物活性，因此作为药物载体它引起了人们的普遍关注。第三 组分的存在对环糊精和配体的包结作用有很大影响，其中醇类对其作用被广泛研狲“。 研究晟多的是包结配合物的结合常数，在近二十年内发展了很多研究结合常数的方法， 常用的方法是在平衡条件下对配合物和自由配体进行分离。毛细管电泳技术因分离速度快、 分辨能力高而引起人们的兴趣，是一种很可靠的研究环糊精和荷电配体作用的方法”1。本文用 亲和毛细管电泳研究了不同醇类对萘普生和口一环糊精结合的影响，所添加醇碳链越长，其结 合常数越小，结果与文献报道相一致f4】，从不同的角度证明了醇对萘普生和B一环糊精包结作 用的影响。 l实验部分 1．1试剂和仪器 高效毛细管电泳仪(安捷伦科技有限公司)。石英弹性毛细管(河北永年光导纤维仪器厂)： 总长度50cm，进样口距检测器长度41．5tin．内径50啪。 二次重结晶的B一环糊精。萘普生由南京药检所提供。其它试剂均为分析纯。 1．2实验方法 新毛细管用l 进样前用lM的NaOH、二次蒸馏水、缓冲液依次冲洗3分钟。 测定在缓冲液中添加不同浓度的13-SF期精时萘普生出峰时问的变化。在样品中添加浓度 为2．5 mbar)进样5 KV： p．g／ml的二甲亚砜检测电渗流。压力(50 s：运行电压：20 紫外检 测波长：214nm。 2结果与讨论 2．1理论依据 当缓冲液pH为710时，萘普生(pI=4．7)带正电荷。而B一环糊精是非离子化合物，所 以萘普生和p一环糊精的复台物的荷质比小于萘普生，其电泳速率(v锄)也小于萘普生。因为 v。E=v旷Vein，复合物的迁移速率大于自由蔡普生。萘普生出峰时间决定于其自由．组分和络合 组分的比例。当缓冲液中环糊精浓度越大时。萘普生的出峰时间越短。 从文献[4】得知，桑普生和p一环糊精的结合比为I：I。结台常数K和荔普生的迁移速率有 复台物的电泳速率．m．表示所测电泳速率。以l皿为横坐标，1／(帆-mr)为纵坐标，正=截矩 ，斜率。 2．2计算结果 表I不同醇存在时萘普生和B一环糊精的结台常数 醇 回归方程 结合常数K(M_’) 6916x 510 无醇 Y=8．0027+15 由表1可以看出，随着添加醇碳链长度的增加，萘普生和B一环糊精的结合常数逐渐减小。 参考文献 [1】朱利中，戚文彬，化学试剂[J】’1991，13：156 Y’Bohne [2】Liao C，J．Phys．Chem．叨，1996，100：734 K L’Zimmermann 【3】Larsen w’J．Chromatogr．A【J】，1999，836：3 B C M，AuH，EvansH，J 【4】Partyka photoehem．photobi01．A：Chem．【_I】，2001，140：67 Determinationof the Constantof andB—CDinthe