实验二果蝇唾液腺染色体的制备与观察.doc

实验二：果蝇唾液腺染色体的制备与观察 一、实验目的 1、练习果蝇唾液腺的分离方法 2、掌握唾液腺染色体的制片技术 3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征 实验原理 1、双翅目昆虫（果蝇）幼虫期的唾液腺细胞很大，其中的染色体称唾液腺染色体，相当于一般普通染色体的100－150倍，又称巨大染色体。 2、在幼虫发育过程中，唾液腺染色体仍进行复制，但细胞只生长不分裂，从而产生多线染色体。多线染色体经染色后，出现深浅不一、宽窄不同的横纹，这些横纹的数目和位置是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。如果染色体缺失、重复、倒位、易位等结构变异时，很容易在唾腺染色体上识别出来。 3、多线染色体的特征：a 巨大；b体细胞配对，所以染色体只有半数（n=4）；c 各染色体的异染色质多份额着丝粒部分相互靠拢形成染色中心；d 横纹有深浅、疏密的不同，各自相应排列，这意味着基因的排列。 三、实验材料和用品 实验材料：黑腹果蝇的三龄幼虫（选择行动迟缓、肥大、爬上管壁、就要化蛹了的三龄幼虫观察最佳） 实验用品：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸。0.9%生理盐水、 1％醋酸洋红。 四、实验步骤 1、 载玻片置于显微镜下，上面滴加一滴生理盐水，放上果蝇幼虫（有一钝尾和带黑色口器的尖头，可根据其在盐水中爬行方向确定头部），两手各拿一枚解剖针，左手解剖针按住幼虫的后端1/3, 右手解剖针按住头部(尽量靠近口器)用力后拉，把头部从身体拉出，唾液腺随之而出。（一对双叉形透明的囊状腺体）。 2、 除去幼虫其他组织部分，把唾液腺周围脂肪组织（不透明）剥离干净，然后将多余生理盐水吸走，滴一滴醋酸洋红在载玻片上。 3、 染色10 分钟，盖上盖玻片，用滤纸轻压一下吸去多余的染色液，然后平放在桌子上，用大拇指适当均匀用力压住，并横向揉几次（勿使盖玻片移动，用力和揉动是一个方向，不能来回揉！）。 4、 显微镜观察，先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，再高倍镜观察。 用显微镜可以看到四对染色体，第一对染色体（X-）组成一个长条，第二和第三对各自组成了具有左右两臂的染色体对，它们都以中部的着丝区聚集，而第四对染色体很小，分布在着丝区呈点状或盘状。这样，从压好的较为模式的片子中便可看到五条弯曲展开的染色体臂（X-、L、R、L、R），和一个点状的第四染色体对，它们在着丝区构成染色中心并向四周伸开。 1、检查你的制片，寻找形态良好、分散适中的图仔细观察各条臂的特点。 2、画出所制染色体的形态，并标出明显的横纹特点。