色谱指纹图谱指数在大青叶毛细管电泳指纹图谱的研究中的应用.pdfVIP

色谱指纹图谱指数在大青叶毛细管电泳指纹图谱研究中的应用 孙国祥刘晓玲孙毓庆毕开顺 (沈阳药科大学药学院辽宁沈阳III)DltB， gxswmwys@163．com) 大青叶(Folium tinctorium IsatidiS)为菘蓝、马蓝和蓼科草本植物廖蓝(PolygonumAit．)的干燥 叶，具有清热解毒、凉血消斑等功效’“。大青叶的活性成分有靛蓝、靛玉红、腺苷和色胺酮等。本文以毛 细管区带电泳法对大青叶的水提取液进行了指纹图谱初步研究，结果具有重现好和稳定的特点。本文对大 青叶药材的质量控制提供了新的参考方法。 l仪器与试剂大连江申HPCE-10高效毛细管电泳仪(大连江申分离科学技术公司)；自制重力进样器：HS2060 超声波清洗器(HENGAO T＆D)；数据由江申色谱工作站记录(大连江申分离科学技术公司)。分析纯硼砂 chemieAG)： 和硼酸(沈阳化学试剂厂)；胞苷对照品Cytidin(Fluka 1．1对照品溶液的制备精密称取胞苷对照品10．0 II山量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，超 mg，置50 u 声5分钟，得200 g．mL。1的胞苷对照品溶液。 1．2样品供试液的制备精密称取于60℃干燥40min的大青叶药材2．50 mL，回流提取2 g，加水50 hr，滤过，残渣加水30ⅢL继续回流2hr．合并两次滤液，减压浓缩至10mL，以80％(v／v)乙醇醇沉 24hr，回收乙醇至无醇味，同法进行二次醇沉，最后将样品液定容至25Il止，摇匀，作供试液，进样前 用0．45um滤膜过滤。 u 1．3电泳条件石英毛细管65cmX75m．I．D．，有效长度50 gin(河北永年光导纤维厂)；紫外检测波长228 nm；灵敏度O．002AUFS运行电压12．5kV；BGE为硼酸(100mmol·L-1)：硼砂(50nunol·L‘1)=II：10(调 pH11)；电流约125 IZA：重力进样20S(高度8．5cm)：每次实验开始前用BGE冲洗毛细管柱5分钟，再运 行5分钟后进样。 2大青叶毛细管电泳指纹图谱(CEFP)的建立 样品定性试验结果表明，图中的6号峰为胞苷峰，以其作为参照物峰，按照指纹陶谱的建寺方，测定 11个不同产地的大青叶药材CEFP，得到大青叶标准CEFP的数据见表l，大青叶的标准CEFP见图1。 表1 大青叶标准CEFP致据 Table1 Thedataof inthestandardCEFPforBelamcanda fingerprints Chinensis(L)．DC 2．1重现性试验精密称取测定大青叶指纹图谱的10产地混合药材2．50 g，照供试品液制备方法制备5份 样品溶液，分别在电泳仪上进样测定，并记录指纹图谱。以第6号峰为参照物峰，计算18个共有峰相对峰 面积的RSD值除15号峰为8．2％，16号峰为7．6％，13号峰为7．9％，其余不大于4．9％，基本符合指纹图 谱要求。 2．2大青叶的色谱指纹图谱指数F和相对指教Fr【41 色谱指纹图谱指数F从揭示中药指纹图谱信息的丰富程度和分离情况，反映指纹信号强度的大小、均 化程度来评价指纹图谱的差异，基本内容为：n个指纹峰，基线分离的峰对数为121(R≥1．5)，则 夕=j之…(1)，因此B值代表分离的效果，称为有效分离率。将n个峰作谷谷积分，则总分离信号 乃一l