氯化镧与三氟乙酸与壳寡糖对棉花细胞诱抗关系的研究.pdfVIP

第二届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会 氯化镧和三氟乙酸与壳寡糖对棉花 细胞诱抗关系的研究 郭红莲 白雪芳 杜昱光 李曙光 (中国科学院大连化学物理研究所辽宁 大连116023) 摘要：壳寡糖诱导棉花细胞苯丙氨酸解氨酶(PAL)和超氧化物歧化酶(SOD)活性增加，钙信使系统参与壳寡糖对棉 信使传导后，壳寡糖对细胞PAL酶活性的诱导作用有不同程度的降低。单以LaCl：处理下，壳寡糖对SOD酶活性的诱导 作用与未用拮抗剂处理的差异不大，而加入TFA的两种处理则诱导作用降低。除钙信使系统外，壳寡糖的诱抗作用可能 还存在其他途径进行信息传递。 关键词：LaCl，和TFA壳寡糖诱导抗性棉花 激发子诱发植物抗病性的报导很多，其 见到有关诱导抗性与钙信使关系方面的报 中相当大的一部分是来源于生物的激发子 导。 一寡糖类激发子，尤其是来源于一种病原 来源于海洋生物的寡聚氨基葡糖(壳寡 菌大豆大雄疫霉(Phytophthora糖)可以诱导多种植物如棉花黄萎病、烟 megaspermaf．sp．glycinea)的寡聚半乳糖草病毒病等的抗性n0’111，其激导抗性的机 醛酸激发子的研究较为深入，许多人认为 理目前尚不清楚。本文研究在壳寡糖诱导 寡糖激发子可能是通过激发细胞内抗性信 的棉花悬浮细胞中加入LaCl，和TFA的各种 号物质的转导来激活植物的防御反应体系 处理条件下，细胞内PAL酶活性的变化和 的n，2_1。植物体内苯丙氨酸解氨酶(PAL)是SOD酶活性的变化，以探讨壳寡糖的诱抗过 莽草酸途径衍生的苯丙烷类代谢途径的关 程与Ca2+／CaM的关系。 键酶和限速酶，主要影响木质素前体的形 1材料和方法 成，在植物埘病害的防卫反应中被认为是 1．1材料 防卫基因表达的产物之一，其活性常被看 成是植物防卫反应的指标。超氧化物歧化 酶(SOD)是细胞膜脂过氧化防御系统的主胞由下胚轴愈伤组织经悬浮培养得到，培 要保护酶，在植物体内的主要作用是清除 养条件：改良的Ms培养基，光照12h．d～， 代谢过程中产生的超氧阴离子自由基 光照度15001x，温度为25±1℃，转速为 (o：’一)，催化活性氧发生歧化反应产生无毒 ii0—120转／分摇床培养，每20天继代培养 的分子氧和过氧化氢，从而使植物免于遭 一次，稳定培养1年。 受各种伤害，较高的SOD活性是植物抗病 壳寡糖激发子由酶降解法获得，聚合 的生理基础L4,5,6．J。 度为3—7。 ca2+作为植物体内主要的第二信使，可 LaCl，和TFA购自百灵威化学试剂公 能参与了多种植物的抗逆性反应，植物发 司。 1．2方法 生抗性反应过程中，ca2+与CaM结合活化其 1．2．1壳寡糖诱导处理以45009离心 靶酶而调节生理过程，氯化镧(LaCl，)是 细胞内钙离子通道的竞争性抑制剂，三氟 收集培养细胞，然后以培养基洗一次，按 乙酸(TFA)是细胞内CaM专一性的拮抗剂5009(细胞干重)．L。的浓度重新悬浮在相 口^州，两者都可阻遏Ca2+／CaM信号的转导。同的细胞培养基中，在与处理前相同的培 但在植物诱导抗病性的研究中，目前尚未 养条件下维持2h，依0．059．L。的浓度加入 167 第二届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会 壳寡糖作激发子，LaCl，和TFA终浓度都分0D变化0．01的酶量作酶活性单位U，计算 别为0．05mmoi．L～，处理过程中细胞保持在酶比活性，每个样品重复测定三次，取平 悬浮状态。 均值。 做以下7个处理：(1)不做任何处理即1．2．3 SOD酶活性的测定参照王爱国等 空白对照；(2)单以LaCl，处理；(3)加入方法，以NBT光还原抑制率的50％做为酶活 LaCl，摇匀后随即加入壳寡糖；(4)单以壳性单位U¨3{。 寡糖诱导；(5)单以TFA处理；