肺积方对Lewis肺癌小鼠抑瘤率及TNF-α表达的影响.pdfVIP

肺积方对Lewis肺癌小鼠抑瘤率及TNF．q表达的影响 陈学彰 田华琴黄志庆梁贵文黄小青 王斌 (佛山市中医院 广东佛山528000) 【摘要l目的研究肺积方对Lewis肺癌小鼠抑瘤率及TNF．仅表达的影响作用。方法将近交系 C57小鼠51只(其中3只用作传代)常规接种Lewis肺癌，随机分为模型组(A组)、化疗组 (B组)、肺积方组(C组)、顺铂+肺积方组(D组)，每组12只，常规统计各组小鼠的抑瘤 率以及采用免疫组化法测定TNF．a的表达。结果各实验组对肿瘤均有较明显的抑制作用， 抑瘤率分别为30．95％、15．54％、39．79％，瘤重低于对照组，有统计学意义(P0．05)。顺铂组、 肺积方组、顺铂+肺积方组与模型组比，TNF．a积分光度与平均光度均升高，平均灰度降低 (P0．05)有统计学意义。与顺铂+肺积方组相比，顺铂组、肺积方组的积分光度与平均光 度均低于顺铂+肺积方组，而平均灰度高于顺铂+肺积方组(P0．05)有统计学意义。结论肺 积方对Lewis肺癌小鼠瘤组织的生长具有一定的抑制作用，其机制可能与调节肿瘤坏死因子 TNF-a表达的有关。 【关键词】肺积方Lewis肺癌抑瘤率TNF．c【小鼠 原发性支气管肺癌(简称肺癌)是常见的恶性肿瘤之一，近数十年肺癌的发病率和死亡 率都有明显增高的趋势，目前已成为我国首位恶性肿瘤死亡原因IlJ。中医学认为肺为娇脏，位 居华盖，喜润恶燥，易受内外邪气的侵袭，肺之气阴最易耗伤，一旦肺脏受邪日久，临床常 表现为气阴亏虚的症候。气阴两虚证是肺癌的主要证型，益气养阴是治疗肺癌的基本大法12J。 肺积方是我院肿瘤内科使用益气养阴法治疗肺癌的经验方。全方由天冬、浙贝、鱼腥草、生 苡米、八月扎、石上柏、北沙参组成。本实验利用细胞生物学技术研究肺积方对Lewis肺癌小 鼠抑瘤率及TNF．0l表达的影响作用。从而进一步揭示肺积方抗肿瘤的作用机理。 1 实验材料与方法 1．1实验动物 1．1．1动物 近交系C57小鼠51只(其中3只用作传代)，189+2．09，清洁级，购自广州中医药大学实 验动物中心，雌雄各半，随机分组。 1．1．2细胞株Lewis肺癌细胞株购自福州迈新生物技术有限公司(批。 1．1．3药物 顺铂：10rag／支，按lm班g(相当于1／10LD50)给药。肺积方药物分别是：浙贝、天冬、沙 参、石上柏、八月扎、薏苡仁、鱼腥草，用文火煎汁浓缩，置于4C冰箱备用。灌胃药物采用 人动物剂量换算公式换算为小鼠用量，每日一次，使每0．4毫升相当于生药609／kg的剂量。 1．2试剂 小鼠肿瘤坏死因子n盯．Q的免疫组化DAB显色试剂盒(上海晶科生物有限公司，批号 。 1．3实验方法 1．3．1动物造模及分组 液氮冻存的Lewis肺癌小鼠细胞复苏后，先接种在3只C57tJ、鼠右腋窝下传代。10天后，脱 颈处死荷瘤小鼠，分离瘤体，取生长良好的肿瘤组织，加生理盐水，制成单细胞悬液，并调 整瘤细胞悬液浓度为1*10 7个／ml瘤细胞。选C57d、鼠48只，于每只小鼠右腋窝皮下接种肿瘤悬 液0．2ml。 3．17 1．3．2给药方法 C57小鼠随机分为4组，每组有12只小鼠。模型组：灌服O．9％氯化钠溶液0．4ml／只，1 次／天，持续14天；肺积方组：罐服肺积方汤剂，按生药80 g／kg给药(相当于60埏成人临床 用量的20倍)，灌服含生药4．0g／ml的中药混悬液每只0．4ml，1次／天，连续14天；化疗组： 顺铂经0．9％氯化钠注射液稀释，浓度为10％，予O．2 ml／只(含顺铂O．02rag)进行腹腔注射， 1次／天，连续5天，之后再行腹腔注射0．9％氯化钠溶液0．2mi／只，1次／天，持续9天，共 治疗14天；顺铂+肺积方组：灌服含生药4．0 ml，1次／天，连续 g／mi的中药混悬液每只0．4 14天，并腹腔注射顺铂稀释液0．2 ml(含顺