血中马钱子碱硅藻土提取紫外三阶导数光谱测定法的研究.pdfVIP

36 血中马钱子碱硅藻土提取紫外三阶导数光谱测定法研究 _——————————————_——————————————————————————————————————————————————————————————一～ 血中马钱子碱硅藻土提取紫外 三阶导数光谱测定法研究 吴玉红邓志军 中国开咀■学院法医系(110035) 张慧丽 辽宁大学生命科学系{110036) 摘要：本文建立了用硅藻土提取血中马钱子碱——紫外三阶导数光谱测定的方法。亲水性材料硅藻 土萃取法是一种新的固相萃取法，其最大的特点是操作极为简单、快捷、实用，提取率高，检出限低。紫外 三阶导数光谱法比普通紫外光谱法抗杂质干扰能力强，能有效的消除杂质的干扰。该法可作为公安基层 办案常规方法。 取检血1．叫，加0．5“去离子水混合均匀，加入到装有2．39硅藻土的层析柱中(5Hd注射器改装． 柱口塞脱脂棉)，待血液完全浸入硅藻土后，用二氯甲烷洗脱，收集洗脱渡8．0Hd于小烧杯，50℃水浴挥至 尽于。用4．oIlll 吸收池1．0era厚石英池。波长范围240--320nm，标尺为±o．005，求导波长差为4m)。 关健词：硅藻土马钱子碱紫外三阶导数光谱血液 马钱子碱是一种常见的生物碱，存于马钱属植物中，民间常用其治疗中风引起的神经麻痹和作为健 胃药，常见使用不当或服药过量引起的中毒和死亡。 生物检材中马钱子碱的提取方法已有液液萃取、GDX固相萃取…等报道。对于液液萃取法，提取液 的杂质含量高，提取率相对较低，容易乳化。固相萃取按所用的固相材料可分为亲脂性材料(如烷基键合 相硅胶、大孔树脂GDX)固相萃取和亲水性材料(如硅藻土、硅胶)固相萃取。亲脂性材料GDX固相萃取 法尽管克服了液液萃取的上述缺点，但操作繁杂、费时。亲水性材料硅藻土分离提取法除具有GDX固相 萃取的优点外，最大的特点是操作更为简便、快捷、实用。用硅藻土提取马钱子碱目前尚未见报道。因此 本文建立了硅藻土分离提取血中马钱子碱的方法。 实验部分 1．主要仪器、材料及试剂 日本岛津UV一250型紫外可见分光光度计；硅藻土：上海化学试剂厂进口分装，粒度为o．020—0． 045rnrn：人血：购自血站，冷冻备用。实验用水：去离子水。马钱子碱：分析纯，质量符合中国药典规定；用 甲醇配制成1．0rng／Inl标准溶液。乙醚、二氯甲烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、苯、盐酸：均为分析纯。 2．检测方法 取检血1．0IIlI，加0．5 IIll去离子水混合均匀。倒人装有2．39硅藻土的层析柱中(5“注射器改装，柱 口塞脱脂棉)。待检血浸没硅藻土后，用二氯甲烷以40—60d，埘n的流速洗脱，用10“小烧杯收集洗脱液 8血．于50℃水浴中挥至尽干。然后用4．OIl】l 为4Lnrn)。 结果与讨论 1．标准曲线的制备 分别取1．0mg／IIll的马钱子碱标准溶液O．002，O，∞5，0 o，6．25“·g／甜 温挥干后．用0．1mffL的盐酸4．oInl溶解残留物，配制成浓度分别为0．5，1．25，2．5，3．75，5 第3期 光谱仪器与分析 37 002 r=0．999 2．硅藻土萃取条件的确定 2l硅藻土用量的选择 本实验中，当溶液总量为1．5rnl(1．Oml血加0 5ml去离子水稀释)时：硅藻土用量为1 59，血溶液未 经洗脱就流出柱子，使萃取无法进行；硅藻土用量为2．og，血溶液随洗脱液有少量流出，杂质较多无法测 定；硅藻二t用量为