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具有GPX活力的含硒GST在大肠杆菌中的表达研究 蒋志华 史金铭 牟颖 阎岗林 罗贵民’ (吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室，长春130023) 硒是人体必需的微量元素之一，硒代半胱氨酸(Sec)是硒在体内发挥作用的主要 形式，通常作为催化基团存在于酶的活性部位。研究表明，See通过共翻译的方式参入 新生多肽链中[1]。有趣的是，Sec是由终止密码子UGA编码。因此，Sec又被称为第 21种氨基酸。在￡coTi中，Sec的参入需要在一个顺式作用元件——Sec插入序列 极低的过程(～2—5％)，因此，利用叵coli直接表达异源的真核生物的硒蛋白仍然是一 个具有重大挑战性的研究课题。 在过去的二十年，酶工程研究领域发生了深刻的变革。酶的合理设计和定向进化成 为酶研究的两种重要的且互为补充的策略。基于酶的结构和序列，对酶进行再设计成为 理解酶的结构与功能的关系及自然界酶进化机制的重要手段。目前，酶的再设计都集中 在改变酶分子的底物或辅因子的专一性及反应的立体专～性，而鲜有改变反应的化学专 一性的报道[2]。谷胱甘肽硫转移酶(GST)代表着一个十分庞大的酶家族，通过催化 GSH对亲电试剂的加成而实现解毒的目的[3]。所有GST的结构由两个结构域组成，即 一个保