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2、正式实验 每组取12只小鼠，称重，标记，随机分为6个计量组，每组2只，分别i.p.0.008％硝酸士的宁0.10ml/l0g、0.12ml/l0g、0.14ml/10g，0.17ml/10g、0.20ml/10g、0.24ml/10g； 3、给药后观察并记录中毒症状，30分钟后记录各组的死亡小鼠数。 [实验结果] 全班结果汇总，计算硝酸士的宁的LD50、LD50的可信限和可信限率。 （１）结果处理 实验资料按下表列出： 受试物剂量 对数剂量　动物数　死亡率　概率单位 LD50 （mg/kg） (X) (只) (%) (Y) 及置信限(95%) ［讨论题］ 什么叫ＬＤ５０？测定ＬＤ５０的意义和根据是什么？ 实验五 利尿药对家兔尿量的影响 一、利尿药 1.定义：是作用于肾脏，增加电解质和水的排出，使尿量增多的药物。 2.分类：根据利尿药的作用部位，可分为高效、中效和低效利尿药 3.呋塞米为高效利尿药 ⑴ 利尿作用特点 ⑵ 作用机制 ⑶ 临床应用 ⑷ 不良反应 二、利尿药的实验方法 1.动物选择 可用大白鼠、小白鼠、家兔、猫和狗，其中以大白鼠较为常用。 2.实验方法 ⑴ 代谢笼实验法：适用于大、小白鼠； ⑵ 直接自输尿管或膀胱收集尿液：适用于较大动物（家兔、猫、狗）。 * * 药学实验教学中心 伍小波 药理学实验 实验一 药理实验基础知识 实验二?不同给药途径对药物效应的影响 实验三 药物的协同作用和拮抗作用 实验四 硝酸士的宁LD50的测定 实验五 利尿药对家兔尿量的影响 实验一 药理实验基础知识 一、目的 1.掌握基本操作，锻炼动手、动脑能力； 2.更好地掌握药理学基本理论知识； 3.培养科学思维 二、?基本要求 1.?实验前：预习实验内容并复习相关理论知识； 2.?实验时 ⑴ 实验器材要妥善保管； ⑵ 实验操作按步骤进行，仔细观察实验中出现的现象，实事求是地做好记录； ⑶ 注意节约实验药品； ⑷ 维持良好的课堂纪律。 3.?实验后 ⑴ 各组同学将实验动物处死，实验台擦干净，将实验方盘送回准备室； ⑵ 值日生搞好实验室卫生，将死亡动物送至指定场所； ⑶ 书写实验报告。 三、实验报告的书写 1.题目 2.目的 3.原理 4.材料：实验动物，器材，药品 5.方法：用自己的语言简单扼要描述出来； 6.结果：要求真实、清楚； 7.讨论：将实验结果进行比较、分析；实验中有哪些不足之处；结果异常或失败的原因； 8.结论：将实验结果进行归纳总结，应带有提示性质。 四、实验设计基本原则 1.随机原则 使每一实验对象都有同等的机会抽到实验组或对照组中，除处理因素外其他因素尽可能均衡一致，从而抵消非实验因素的影响。 2.对照原则 ⑴ 组间对照：阴性对照，阳性对照，同因素不同水平对照； ⑵ 自身前后对照 3.?重复原则 五、实验动物 1.动物的选择 ⑴ 小白鼠：适用于需大量动物的实验，如某些药物的筛选，半数致死量的测定。也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。 ⑵ 大白鼠：比较适用于抗炎药物实验，血压测定、利胆、利尿药实验，也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。 ⑶ 豚鼠：因其对组胺敏感，并易于致敏，故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感，常用于抗结核病药的实验。 ⑷ 家兔：常用于观察研究脑电生理作用，药物对小肠的作用。由于家兔体温变化敏感，也常用于体温实验，用于热原检查。 ⑸ 狗：狗是记录血压，呼吸最常用的大动物。还可利用狗做成胃瘘、肠瘘，以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进行慢性毒性实验时，也常采用狗。 2.实验动物的编号 狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠如为白色可用黄色苦味酸在不同的体表标志上标记。 3.麻醉药的选择 ⑴局部麻醉：常采用2％普鲁卡因做皮下浸润注射，可用于局部手术。 ⑵全身麻醉： ①吸入麻醉：可将乙醚蘸在棉球上放入玻璃罩内，利用乙醚挥发的性质，经肺泡吸收，作用较快，适用于小鼠、大鼠短时间麻醉。 ②注射麻醉：常用戌巴比妥钠和乌拉坦。 4.动物捉拿及固定方法 ⑴ 小白鼠 右手抓住其尾部放在鼠笼盖铁纱网上，用左手拇指及食指沿其背部向前抓起颈背部皮肤，并以左手的小指、无名指固定其尾部，便可将小鼠固定在手上。 ⑵ 大白鼠 用右手提起尾部，放在粗糙面上，左手的拇指和食指捉其头部，其余三指夹住背腹部即可固定。 ⑶ 豚鼠 豚鼠性情温和不咬人，用手握住躯干即可。 ⑷ 家兔 可用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势。在进行仰位手术操作时，可用绳带将其四肢仰位捆绑在兔手术台上