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广西植物Guihala31(1):31—35 2011年1月
海南龙血树RAPD—PCR反应体系的优化
郑道君,谢良商,张 文,张治礼*
(海南省农业科学院农作物遗传育种重点实验室.海口571100)
和引物浓度,Taq聚合酶用量等因子进行研究,分析各因子对RAPDPCR扩增结果的影响。确立了海南龙血
2.5
树RAPD-PCR反应的最佳条件,即在25弘L反应体系中,包含10×bufferpL,2.0mmol/LMgClz,300
f£mol/L和DNA模板20
}£mol/LdNTPs,Taq酶1.5U,引物0.8 ng。以此条件为基础,筛选出适用于海南龙
下了基础。
关键词:海南龙血树;RAPD;反应条件优化;有效引物筛选 .
中图分类号;Q943文献标识码:A 文章编号:looO一3142(2011)01—0031-05
of
RAPD-PCRreaction
Optimization system
n■、 T T●
10r上歹rDCnennCDmDDnZnnn
Zhi-Li*
ZHENGDao--Jun,XIE Wen,ZHANG
Liang-Shang,ZHANG
l Geneticsand 571
aboratory Breeding,HainanAcademyo,Agricultural姗,Haikou100,Chim)
(Key ofCrop
Abstract:Bothfactortestand were to theeffectaofmainfactorsontheRAP】》
single orthogonaldesignappliedstudy
thecontent0f concert-
PCR forDracaerlacambodiana.inwhichthemainfactorsincluded DNA,the
system template
trationof and andthecontentof DNA an R廿DP(IR心
Mgz+、dNTPs Taq polymerase,andoptimal25tJL
primers
action forD.cambodianaWaS 2.5 10×PCRbuffer,2.0mrnoi/L
syStem established,includingpL MgClz,300#moll
L 20 DNA wereselcotedfor
dNTPs,1.5U pmol/L primers
Taqpolymerase。0.8primers,andn
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