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乳酸菌在基因工程领域的应用.pdf

《生命的化学》2008年28卷3期 ·354· ●Current Topic CHEMISTRYOFLIFE 2008,28(3) 文章编号:1000—1336(2008)03—0354—04 乳酸菌在基因工程领域的应用 王瑶 元冬娟 江黎明 (广东医学院生物化学与分子生物学研究所,湛江524023) 摘要:乳酸菌是工业微生物巾一类非常重要的细菌,也足众所周知的维持人及动物健康的重要益生菌群。任最近 十几年来,乳酸菌的遗传学和分子生物学特性很受关注,通过对它们进行遗传修饰改造取得了重要成果。扩大了 它们的应用。 关键词:乳酸菌;工业微生物;质粒;遗传修饰 中图分类号:Q78:Q939.9 acid 乳酸菌(1acticbacteria,LAB)是一类兼性厌氧在乳酸菌的各个属中都发现了质粒的存在,其 的革兰阳性菌,广泛存在于人和动物淌化道、呼吸 数量为一个或多个,它们与糖代谢、蛋白质分解、氨 道和泌尿生殖系统,足调书微生态平衡的重要益生 基酸代谢、细菌素的合成、胞外多糖的产生、抗紫 菌。乳酸菌在动物体内能对糖类代j身于有一定的改善 外辐射以及噬菌体抗性有关。一些乳酸菌质粒复制 作用,可以诱导体内特异性及非特异性免疫,容易 子具有广泛宿主范围,因而可在其他种类的革兰阳 进行黏膜免疫,具有抗肿瘤活性。乳酸菌广泛用于 性菌及大肠杆荫中发挥作用。乳酸菌的质粒已广泛 农业、工业和医药工程等领域,具有很重要的经济 应用于基因工程领域。它们表达外源基冈的方式主 价值,而且它在食品产业等领域中的长期应用,已 要有如下: 1.1构建诱导型表达载体 证明不具有致病性,被公认属于安全级(generally 过量表达外源蛋白质可能 assafe,GRAS)微生物。乳酸蒲足很具吸引会对宿主乳酸菌乍长或代谢造成毒害,或使乳酸菌 recognized 力的基因工程菌n1,是食品级(food—grade)微生物,安能量耗竭,以及质粒丢失。因此采用具有可控制强 全可靠,不产生内毒素,自身的分泌性蛋白质较少, 启动子的诱导型表达载体,不失为进行外源基因表 少了载体微生物的自身蛋白质对外源目的分泌蛋白 达的良好方式,常用的诱导荆有以下几种: 质的干扰;它不产生任何细胞外蛋白酶,不会引起 (1)乳链菌肽。乳链菌肽(nisin)是由乳酸链球菌 分泌蛋白质发生细胞外的降解。鉴于乳酸菌的优良 产生的一种多肽物质,食用后在人体的生理pH条件 性状及广泛用途,对其生物学性质和分子机制的研 和0【一胰凝乳蛋白酶作用下很快水解成氨基酸,不会 究,已经建立和发展r一系列乳酸菌基因克隆和表 改变人体肠道内正常菌群,也不会产生像其它抗生 达系统,为探索其新的应用潜力奠定了基础。 素那样的抗性问题,更不会与其他抗生素出现交叉 1.乳酸菌基因工程表达载体的类型及构建 抗性,是一种高效、无毒、安全、性能卓越的天然 食品防腐剂。在基因工程中,是国际上认可的食品 级诱导剂。 收稿日期:2008-03.03 广东省科技计划项日(NO.2005810401011):广东省自然 科学基金(NO.5011595)资助

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