猪IFN-β的克隆与原核表达.pdfVIP

Sfi 2008 中国兽医学报 2008年5月第28卷第5期C矗砌J％fMay V01．28No．5 485 与原核表达 猪IFN—p的克隆 卜秀娟1，胡仲明2，柳巨雄3，刘晔2，时 琳3，扈荣良2。 (1．吉林大学军需科技学院，吉林长春130062；2．军事 医学科学院军事兽医研究所，吉林长春130062；3．吉林大学畜牧兽医学院，吉林长春】30062) 摘要：根据已发表的AY687281基因序列，设计1对特异性引物，采用PCR方法从长白猪白细胞基因组中扩增到猪 母干扰素基因，将PCR产物克隆到pMDl8一T载体，进行序列测定。序列分析表明，获得的猪lB干扰素基因全长561 而在177位点核苷酸的突变没有改变氨基酸。将该基因克隆到pEGx一4T-1表达载体中，转化宿主菌Rosetta，对猪 B干扰素进行原核表达。重组表达菌经IPTG诱导后，得到高效表达，所表达蛋白约为43ooo，占总蛋白的39．3％， 表达产物主要为包涵体。纯化后的包涵体具有抗病毒的生物学活性，能抑制口蹄疫病毒(FMDV)增殖。 关键词：猪；B干扰素；克隆；原核表达