去甲肾上腺素的荧光分析新体系的研究.pdfVIP

第20卷增刊 分析试验室 Vol.20.Su即 2001年 11月 ChineseJoumalofAnalysisLaboratory 2001-11 去甲肾上腺素的荧光分析新体系研究 陈 鹏，王琼娥，庄惠生 (福州大学化学系，福州，350002) 摘 要:去甲肾上腺素(NE)在pH5的条件下，容易彼氧化成具有荧光的叫味产物.本文根据这一性质。建立了检 测微t去甲肾上睐素的荧光分析断方法.方法的线性范围为。一100aOil,。检浏限为。.，”/‘‘.洲定浓度为2.5 V81mL的去甲贤上膝素时，其相对标准偏差(n-S)为3%左右.方法简仗、快速、德定性及重现性良好，是一种 较好的测定徽I去甲片上睐素的荧光分析新体系. 关键词去T91-上腺素;KIDy荧光分析 1引言 时，仪器灵敏度x4。当线性范围5--100uglmL 儿茶酚胺类物质是肾上腺髓质，肾上腺能神 时，仪器灵敏度X2;激发光狭缝和发射光狭缝均 经元及肾上腺嗜铬体等合成和分泌的。这类物质 为lonm，扫描速度为高速，侧定荧光强度。 及代谢产物的分泌，代谢物的测定在基础研究及 3结果与讨论 临床医学中有着重要意义P1。目前去甲肾上腺素的 31级化剂的选择 测定方法主要有荧光侧定法Ill.放射酶测定法121 本文考察了K104,12,K103,凡Fe(CN)6, 同位素测定法I3!和化学发光法14]等.这几种方法 K2Cr207,H202,KNO3七种氧化剂，结果表明经 中，荧光分析测定法最为简便实用，出现了不少 K104氧化后的体系，荧光强度最大。 新的荧光检测体系is-sl，但有的体系灵敏度和选择 3.2缓冲介质及pH值的选择 性不是很好，检测的范围也较窄。本文在文献f:1 根据文献i1，本文选取了磷酸氮二钠一柠棣酸 的基础上建立了一种采用K104作为氧化剂的简单 钠，柠棣酸一柠橄酸钠，柠橄酸钠一氢氧化钠， 且高效的荧光分析新体系。 邻苯二甲酸氢钾一氢氧化钠。乙酸一乙酸钠缓冲 2实验部分 溶液，Brotton-Robinson广泛缓冲溶液进行考察， 发现柠裸酸一柠椒酸钠，柠橄成钠一组氧化钠， 2.1仪器和试刑 970CRT一荧光分光光度计 (上海分析仪器总 乙酸一乙酸钠缓冲溶液为介质的体系，荧光强度 厂);PHS-2C型精密酸度计 (上海雷磁仪器厂); 都较高。于是随后对三种溶液在pH值4^-7范围 电子分析天平 (上海天平仪器厂)。重酒石酸去 内进行pH选择，结果表明pH为6.2的柠稼酸一 甲肾上腺素 (湖北省卫生局药品检测所，药品检 柠像酸钠级冲溶液介质体系，荧光强度最大。故 验用暂行对照品);K104(北京化工厂):12(中国 选择pH为6.2的柠裸酸一柠裸酸钠溶液作为级冲 医药公司北京采购供应站)等，乙酸，柠棣酸，氢 介质。 氧化钠 (上海化学试剂采购供应站试剂厂)所用 3.3反应时间的选择 试剂均为分析纯级。 从加入高碘酸钾开始计时，用荧光分光光度 计的时间扫描功能进行侧t，所用去甲肾上腺紊 2.2实骏方法 取一定f浓度的重酒石酸去甲肾上腺素标准 的浓度为5ugm(L.结果表明该反应体系在4-5 溶液1.5ml，加入lm[的pH=6.2的柠探酸一柠橄 分钟荧光趋于稚定。因此可确定此体系在加入氧 酸纳级冲溶液，再加入。.iml0.02mo11L的K104 化剂后，可静1反应5分钟。 溶液氧化反应5分钟后，加入0.3ml0.025moVL的 3.4维生斑C称定增强黄光时间选择 Na2S203溶液除去多余的K104。再加入 lml 加入孩性维生素C的目的是用来稳定和增强 0.05moVL的维生JC溶液，静tI0.5h后，进行侧 荧光，这一过程一般需30分钟，因此体系反应完 定.所用比色皿为 Icm石英比色皿，激发波长 全后还应静t半个小时。