压电免疫传感器检测鼠IgG二抗地研究.pdfVIP

啦’99 压电免疫传感器检测鼠IgQ二抗的研究 樊敏余涛·郑自攀崔大付 中国科学院电子学研究所传感技术国家重点实验室 北蒯i100080 套 crystal 摘要在压电晶振QCM(quartz microbalance)金电盼瓤匾采用蛋白质A一 金的方法制各生物敏感膜，测试分析此膜与鼠IgG二抗的生物亲和反应，从而研究高灵敏 度的压电晶体生物亲和传感器。实现了徽克级测量。试验了制备生物敏感膜的不同方法。 关键词压电晶振生物亲籼凑感器lgG ． 一．引言 生物传感器由生物分子识舄吐部分和信号转换传递部分结合而成．目前，已经发展出了 多种形式的生物传感器，但’占们锕以归为两犬类：生物f斟匕传感器和生物亲和传感器。生 物催化传感器是利J{j生物酶等催化物，选择性地催化待测物，而生物亲和传感器则是利用抗 体、结合蛋白、补体蛋白等生物分予与特定物质发生亲和反应，从而识别特测物。本文将讨 论一种基于抗原抗体免疫反应的生物亲和传感器。 抗原是一种物质，它能刺激机体产生抗体，并能与由它诱导产生的相应抗体发生特异 结合。抗体是机体受抗原刺激后，由淋巴细胞合成的免疫球蛋白。培G是正常人心爵中含量 最多的一类免疫球蛋角。它具有4条多敬链组成的基本结构，可以分为Fc段和Fab段。Fc 段具有免疫球蛋白的抗原决定簇及其它生物学活性，而F出段具有与相应的抗原相结合的功 能．本研究采_【lj的抗原，抗体分别为鼠k；G、鼠增G二抗一羊抗鼠lg吼 quartzcrystalmicrobalance)，由于石英晶体 石英晶振又称石英晶体微天平(Qat 本身的压电效应，晶体表面若吸附了外部物质，晶体的振荡频率将会减小。对于AT切割的 压电晶体，Sauerbrey导出了晶体频率变化与吸附物质质量的关系： AF=-2．3xl胪产△彬A (1) 式中 △F—甄率的变化，Hz F—a体基本谐振频率．Hz △M—吸附物质的质鲑变化，g A一晶体电极投影重叠区决定的晶体有效面积，c舻 本研究采刚的石英晶振的F为锄z，A为0．3070d，则由式(1)可得：AF=-2．697×lO蛐， 即只要晶体电极表面裔3．7ng的质蛙变化，便船使晶体有lHz的频率改变，这种压电晶体传 感器灵敏度离、选择性好。 二．实验 1．材料 蛋自质A、鼠fgG从帮定公司购得．蛋白质A为Sigma进口分装：鼠lgG为军事医学毫 科学院制各；羊抗鼠IgG由华美公司提供：牛血清蛋白BSA由红兴化学试剂分装厂提供。 其它化学试剂均为分析纯。 ·总装防化研究院第三所 2．生物敏感擞豹静I备 生物活性敏感骥的制备实际E就是将抗原通过一定途径固定在压电晶体上，但又不影响 免疫反应的进行．是免疫传婷器研制中的关键技术之一。主要的固定化方法有吸附法、交联 法、蛋白^—金法三种． 吸附法是选用非水溶性载体通过物理吸附或离子结合．使抗原或抗体分子固定化． t 交联法是借勘双功能试荆使生物分子结台到惰性载体E或使它们彼此联成网状结构． 蛋白A一金法是近儿年发展起来的—种方法．蛋自质A可以直接吸附于金表面井形成稳 定的结合休，金—蛋白质A复台物高度稳定。其结台常数为10阳-1，—般为范德华力．同时． 蛋白质A又能与各种免疫球蛋白190的Fc段相结合，而不影响I粤；G的兔接反应结合位点． 量 有关学者对这三种方法进行了对照比较，认为蛋白A一金法重现性好，检测范围广。且线性 好，对生物分子活性损失小- 本研究采月j了蛋白A一金法。以前有报道日j：佥一蛋白质A结合体检测Ig