乙型肝炎与慢性丙型肝炎患者混合感染庚型肝炎病毒的致病性研究.pdfVIP

乙型肝炎及慢性丙型肝炎患者混合感染庚型肝炎病毒 的致病性研究 黄健 朱万孚。 孛朋 庄辉(北京大学基础医学院微生物学系100083) 李倬郝蛙(北京佑安医院肝炎研究所100054) 孙静嫒 王笑梅(北京地坛医院100011) 【摘要】 为探讨庚型肝炎病毒(GBV．C,HGV)感染有无致病性，刺用庚型肝毙病毒不同基因区序列设计井优 选出5套引韵，建立起灵敏、特异的HGV逆转录套式聚台酶链反应(RT-mCR)检测方法。应用此方法对临床上诊断 为己型肝{眨及慢性丙型肝炎的患者，按照其血清中HGVRNA的用性与否分组，并进行病倒对照研究。结果显示， 肝致病性。 【关t谲】庚丑肝炎病毒；乙型肝炎病毒；丙型肝炎病毒；致病性研究 1995年，美国的Simons等…和Linnen口1等分别 HDV及抗．HEV均为阴性。 从肝炎患者的血清中克隆出庚型肝炎病毒(GBV—Ct 慢性丙型肝炎患者血清取自1994年9月本室在 HGV)的病毒基因，经核酸序列分析，它们均属黄病河南周口地区普查发现的病例及周口地区医院记录 毒科，为同一病毒的不同分离株．流行病学调查显 完整的少量门诊病历，共90例。 示，GBV—CiHGV与乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎2．引物 病毒(}删)的混台感染较为常见，这可能与三者具 共使用了5套引物，其中引物A、B、C采用美国 有类似传播途径有关。为了进一步了解HGV与 5．0辅助设计， 最新分子生物学计算机软件包Oligo HBV或HCV感染之间的关系以及HGV的致病性，由上海生工生物工程公司合成。引物D根据文献设 我们在优化逆转录套式聚合酶链反应(RT-nPCR)检计合成“’。引物E由北京市肝炎研究所李倬医师惠 测方法的基础上，对临床上诊断为乙型肝炎及慢性 丙型肝炎的患者中，单独HBV或HCV感染的患者及守引物设计原则”1。引物序列如下： 与HGV合并感染患者的血清肝功能水平进行了分析。 A：PlCCACTCGTCClI-rCTCAACTC P2TcTTGGTAGCCAcTATAGGTG 材料和方法 P3GGCA从GcCTATlBG代AAG 1．血清标本 P4AGAAAGACCACeeTcCACAG B：P1CCACTG帆CTrGTcAAC代 从100例职业献血员血样中筛选出的18例 P2 TGG HGVRNA阳性血清标本由中国药品生物制品检定 TCT TAGCCACTATAGGTG 所提供；10例抗．HGV阳性的非甲一戊型肝炎患者血 P3GGCA从GCCTATTGGTCAAG 清标本，由北京市肝炎研究所提供；本室血清库的10 C：PIAGGTGGTcGATGGGTGAT 例正常人血清标本，肝炎病毒标志物均为阴性。 P21BCCACCCGCCCTCACCCGAA 急、慢性乙型肝炎及肝硬化患者人院第l天的 P3TGGTAGmGTA从TCCCGGT P4cGAGcT cATccTT 血清标本，共413例．由北京地坛医院和北京佑安医 GGGl∞CcT 院肝炎研究所提供。病例分别由指定医生收集，按 D：P1TCTTGGTAGCcAcrATAGCTG 照第十次全国病毒性肝炎与肝病学术会议修订的病 P2TGCCACCCGCCCTCACCCGAA AC 毒性肝炎诊断标准。’确诊，抗．HAV