提高脂质体介导转基因表达地研究.pdfVIP

提高脂质体介导转基因表达的研究 张景迎陈诗书 上海第二医科大学生物化学教研室，分子生物学实验室 人类基因治疗研究中心 200025上海 基因治疗用转基因方法包括病毒学和非病毒学方法。二者各有利弊：前者转导表达效率 高，但存在安全性差、较繁琐等缺点；后者，尽管转导效率低，但安全性好、较简便，更利 于临庶推广使用，值得进一步研究改进。若能借鉴二者之优点建立转导表达效率较好、安全 简便的转基因表达技术，无疑将推动基困治疗在临床疾病治疗上：的应用。因此，我们研究的 目的在r优化艏质体转基因技术，主要从脂质体选择及质粒表达载体构建这二方面入手。首 疫组化方法检测结果显示：最优条件下．新型阳离子脂质体Dosper转染效率最高、 响较大。评估转染效率时发现，免疫蛆化方法更好地反应了转染效率，而X．gal染色则低估 i转染效率达1-2倍。其次，利用甜W表达谰控元件及内含f，运过诬克隆技术构建了病毒 机理尚不清楚，可能与AAv．ITRs增加质粒表达载体在细胞核内的存留时间有关：内含子 粒表达载体，结合较好的阳离子脂质体可以更好地提高该基因转移技术的效率。IRES的使 用使得联合基因转移和基因治疗变得更为简便，尽管下游基因表达水平较低，但如果选择合 适的基因进行搭配使其保持不同水平的表达，也许成为有利的一个方面。这种病毒学与非病 毒学方法的联合有可能建立既简便使用又安全有效的基因治疗用基因转移方法。 ● ．59- 提高脂质体介导转基因表达的研究 作者： 张景迎， 陈诗书 作者单位： 第二医科大学生物化学教研室,分子生物学实验室,人类基因治 疗研究中 本文读者也读过(10条) 1. 刘国彦.孙诚谊.潘耀振.李茵.王玉芝.LIU Guo-yan.SUN Cheng-yi.PAN Yao- zhen.LI Yin.WANG Yu-zhi 阳离子脂质体介导BEL-7402、QBC、BXPC-3瞬时转染 率比较[期刊论文]-贵阳医学院学报2006,31(4) 2. 潘敏慧.刘敏.刘佳.杜娟.张春东.鲁成.PAN Min-Hui.LIU Min.LIU Jia.DU Juan.ZHANG Chun-Dong.LU Cheng 阳离子脂质体转染家蚕培养细胞的技术体系 研究 [期刊论文]-蚕业科学2008,34(4) 3. 孙新明.魏泓.赵永聚.王爱平.SUN Xin-ming.WEI Hong.ZHAO Yong-ju.WANG Ai-ping 脂质体法介导山羊精子转染外源DNA最适条件的研究[期刊论文]-西南 大学学报（自然科学版）2007,29(6) 4. 赵文恩.康保珊.焦凤云.张软爱.ZHAO Wen-en.KANG Bao-shan.JIAO Feng- yun.ZHANG Ruan-ai 类胡萝卜素的抗癌作用与基因表达的联系 [期刊论文]-生物 学杂志2006,23(2) 5. 粟文俊.蒋泓.唐冬生.洪亚辉.Su Wenjun.Jiang Hong.Tang Dongsheng. Hong Yahui 脂质体转染巴马猪胎儿成纤维细胞条件的优化[期刊论文]-中国农 学通报2011,27(7) 6. 迟福.刘顺英 脂质体转基因应用的研究进展[期刊论文]-中国肿瘤临床与康复 2001,8(2) 7. 董建将 阳离子脂质体的转染机制和影响转染效率的因素[期刊论文]-牡丹江 医学院学报2008,29(4) 8. 靳静晨 烟草中依赖于NAD+的山梨醇脱氢酶基因的克隆及功能的初步研究 [学位论文]2008 9. 程龙军.郭得平.张建华.马芹标 高等植物花生长和花色素苷生物合成的信号