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Translation Translation in prokaryotes 蛋白质生物合成体系 氨基酸的活化与搬运 核糖体循环 多聚核糖体 Translation in eukaryotes Posttranslational processing 蛋白质生物合成体系 1、mRNA 2、核糖体 3、tRNA 4、起始因子、延长因子和终止因子 5、氨基酰-tRNA 合成酶 mRNA：模板 遗传密码(genetic codon)：三联体密码（triplet code) 遗传密码的破译：遗传密码表 遗传密码的特点： 连续性(commaless) 有起始密码(AUG)和终止密码(UAA,UAG,UGA) 简并性(degeneracy) 摆动性(wobble) 通用性(universal) mRNA(messenger RNA)是翻译的直接模板 三联体密码（triplet code) 密码子与反密码子配对的摆动现象 核糖体（ribosome)：场所 1、有容纳mRNA的通道 2、能结合起始、延长及终止因子等。 3、有A位（acceptor site)和P位(donor site). 4、有转肽酶活性，催化肽键形成 5、大亚基上有延长因子依赖的GTP酶活性，可为转肽提供能量。 tRNA：接合器 一种tRNA只能与一种氨基酸结合，一种氨基酸可与几种tRNA结合。 结合位点为：3`端CCA-OH。 Ala-tRNAala; met-tRNAemet;携带延长中的肽链上的蛋氨酸 fmet-tRNAfmet：起始tRNA(原核生物） Met-tRNAimet 起始因子（ initiation factor)  参与蛋白质起始复合物的形成。 IF-1：促进IF-2和IF-3的活化。 IF-2：促进fmet-tRNAfmet与30S小亚基结合的作用，并有依赖核糖体的GTP酶活。 IF-3：使30S亚基释放，辅助mRNA与小亚基结合，并阻止大小亚基重新聚合。 延长因子(elongation factor) EF-Tu:与氨酰-tRNA及GTP结合形成EF-Tu.GTP.AA-tRNA，将氨酰tRNA转入A位。 EF-Ts：在GTP供能时，使EF-Tu.GDP转变为EF-Tu.GTP. EF-G：依赖于核糖体的GTPase，使GTP水解，并有移位酶作用。 终止因子(termination factor 又称为释放因子(release factor,RF) 功能是识别mRNA上的终止密码子,终止肽链的合成并释放出肽链。 RF-1:识别密码子UAA及UAG RF-2:UAA及UGA RF-3:结合GTP,并促进RF-1及RF-2与核糖体的结合。 氨基酰-tRNA合成酶 既能识别特定的氨基酸，又能识别转运该氨基酸的tRNA。 氨基酸+ATP+tRNA 氨基酰-tRNA +AMP +PPi 氨基酰-tRNA合成酶可发挥较对功能，使误载的氨基酰-tRNA从tRNA上释下，保证遗传信息翻译的准确性。 核糖体循环（ribosome cycle) 起始（initiation) 延长(elongation) 终止（termination) 起始（initiation) 1、核糖体大小亚基的解离：IF-3、IF-1 2、mRNA与小亚基结合。AUG上游8~13个碱基处存在SD序列（Shine-Dalgarno sequence),能与小亚基中16SrRNA3`端序列互补。 3、fmet-tRNA的结合：IF-2、GTP、IF-1 4、大亚基结合：IF-2有GTP酶活，各IF释放。 延长(elongation) 进位（注册）： 先形成EF-Tu.GTP.AA-tRNA复合物 转肽 肽酰转移酶，不需GTP，位于大亚基，中心含23SrRNA。 移位 EF-G，GTP供能。 终止（termination) RF 核糖体转肽酶变为水解酶活性。 多聚核糖体（polyribosome) 在一条mRNA链上常结合有多个核糖体，呈串珠状排列，同时进行多肽链的合成。 每个独立的核糖体都能合成一条完整的多肽链，因此从同一模板上同时能合成多条多肽链。可提高mRNA的利用率和蛋白质生物合成的速度。 真核生物蛋白质合成的特点 起始阶段 （1）在核内合成mRNA前体，加工并与多种蛋白质结合成核蛋白颗粒，转入胞浆。起始时其二级结构需要松解，并放出多余的蛋白质。 （2）Met-tRNAiMet （3） 起始复合物：40S-mRNA-Met-tRNAiMet （4）没有SD序列。帽子结合蛋白结合mRNA上的帽子结构。 （5）至少9 种起始因子。 eIF-2：GTP结合蛋白，与GTP结合后携带起始Met-tRNAiMet进入40S小亚基。 eIF-4A：ATPase