多酚氧化酶抑制剂在液-液界面电化学行为地研究.pdfVIP

分析化学的成蛲与挑战 多酚氧化酶抑制剂在液．液界面电化学行为的研究 范瑞溪徐肖邢冯立军卜广昆祁英华 (苏州大学化学化工系苏州215006) 关键词氰根硫根多酚氧化酶多巴胺ITIES 在多酚氧化酶存在下，多巴胺(水相)与二茂铁(油相)在液液界面进行电子传递的研究 已在前文中做过报道。本文阐述了多酚氧化酶抑制剂对多巴胺与二茂铁在液液界面传递电子的影 响．从而测定多酚氧化酶抑制剂——氰旅和硫根等。 1实验部分 具有正反馈功能的四电极循环伏安仪和半微分转换器，X-Y函数记录仪(四JII仪表厂)，四 操作参见文商咿1。 2结果和讨论 2．1实验条件的选择 2．1．1溶液酸度的影响 多巴胺在碱性溶液中不稳定，易分解。多酚氧化酶的催化活性也与溶液的酸度有很大关系。 实验表明，当溶液的酸度控制在pH=5左右时，伏安峰的峰高较稳定，易于测量。本实验选用pH=5 的HAc-NaAe缓冲体系。 2．1．2抑制剂加^顺序的影响 实验发现，抑制剂对多酚氧化酶的抑制效力与它加入试液的顺序有很大关系。当固定水相 中多酚氧化酶的量后，先加抑制剂，再加入多巴胺．与先加多巴胺再加抑制剂相比较，前者的灵 敏度远远大于后者。这是由于酶的存在，多巴胺即在酶的催化下．被溶液中溶解的氧所氧化，抑 制剂也就失去了它应有的作用。 2．1I 3温度的影响 温度过高或过低都将刚氐酶的催化活性。本实验温度控制在20℃～25℃为宜。 2．2峰电流与抑制剂敢庹的关系 TPAsTPB、O．05mol／L mol／L mol／L 在O．1 LiCl(、Ⅳ)、0．005 FeCP2(O，体系中，固定多巴胺和 多酚氧化酶的实验条件下，峰电流与抑制剂的浓度呈线性相关。例如，硫离子的线性范围为 2．3样品的测定 以测定农药厂污水处理后排放水中的硫为例，所得结果概述如下。 2．3．1重现，眭争回收率 在同一实验条件下，连续测定8次，所得峰电流的相对标准偏差在1．8％以内。回收率在 96．4％～103．2％。 2．3．2测定结果(略) 3小结 多酚氧化酶是一种含4个铜原子的有机化合物，这4个铜原子分别两两相联，构成2个活 675 —— 坌堑些兰箜生塾皇些塑 性中心，担负催化氧化多巴胺的任务。当溶液中含有能掩蔽铜的物质如s*、CN一、CNS一等离子 存在时，使酶的催化氧化活性减弱，从而影响了多巴胺与二茂铁在液液界面的电子交换，峰电流 降低。 也可看到，抑制剂抑制酶的催化活性的能力与它络合铜的能力有密切的关系。所以s。的检 出下限比CN-的检出下限低。此外峰电流与c的线性范围较窄，这是由于溶液中酶的浓度较低． 限制了所加入抑制剂的上限浓度。但它的专一性和低的检出限是毋庸质疑的。 参考文献 1吴莹．范瑞溪，狄俊伟．分析化学，1996，24：873 2 J．EIcctroam．Chin,．1989,261：771 FanRX锄dWangXP 3 Himmelwri6htRS，Eickr姗NC’LubiatCD，LcrckK eI∞t-∞b把solution FanRuixi Bu XuXiaoxingFengLijunGuangkung Ymghua andChemical University,Suzhou (DepartmentofChemis廿y Er《§11ee血马Suzhou 215006)