壳聚糖固定化木聚糖酶地研究.pdfVIP

生产制备技术与制料研究论文 全国第六届工业生化学术会议f19孵，福建)论文集 壳聚糖固定化木聚糖酶的研究 朱启忠 5) (菏泽师专生物系，菏泽27401 摘要：从，。霉素ra8提取出朱聚糖酶，将其闫定在用戊二醛定联的壳聚糖载体 上．1．Og壳聚馆与4％的结合嘲迁3．5mg嚣白，酶活回收率为46．6％。原酶的最适pH 为4．6，固定4，酶为pH3．8。原酶的最适温度为55’：，匿定化酶在60“75L郜具有较 高r活性． 固定{巴酶的耐热性优-『f啄酶。固定化酶的表现Km值略低于原酶，前者为5．0 ×10 x10 2矶，后乎为3．58 2∥L． 关键词：-’：聚糖，木聚搪酶，固定化酶 的扦发利用已引超人。门的爵遍关注， 其币：食品T．业、日化工、It和医药T‘业等疗面邬具有J泛的用 途n一。观巾不少文献报道壳聚糖的Ⅲ途、作为生化载体就魁其中．：一壳聚桔址神湖状载体， 具有机械性能良好，fl学性质稳定、蒯热性好等优点，特别是j土分子畸t存住的氯基．既易与蛋白 和酶的载体， 近些{’来受到同内外小少学苦的重视，已成功地在壳聚糖上固定r蹴胜磷酸酶、酸 性磷酸酶、淀粉酶、f¨冬氨酸酶及纤维素酶等f‘几种酶。 1}纤维素是一种I{题雾精，约占陆隹植物下重的15～30％，微生物生产的半纤维索酶可降解 半纤维索生产木糖段j他单糖， 本聚搪酶足半纤维素酶的一利r 研究半纤维素转化具有覆要意 义、蛐藉!造纸工1t的一}物制浆和废水处理、转化半纤维素为单糖等在旧外已有干：少有关荩菌和 细菌降解芈纤维索的{=f‘究2¨，国内也已逐步开展，们有戈木粜糖酶的嗣定化尚木见报道。本研 究通过对产胞外术聚桃酶菌株进行培自：，提取木聚糖酶． 许将接通过戊■醛交联吲定十壳聚糖载 体上，制成同定化酶，薛对固定化酶的摄适条件及稳定性等性质进行了探讨 l材料与方法n (略) 2结果与讨论 2．1戊二醛浓度对固定化酶活力的影响 平行取6份1．09壳装糖于6个小烧杯中，分别加入不同浓度的戊二醛(1～6％)浓度4．0mL， 梭上方法制得固定化酶，并测定其固定化酶活力， 发现固定化酶插力随戊一：醛裱度增加而增大． 但戊二醛浓度达4％时， 固定化酶活力则趋于稳定。由于壳聚糖是一种氪基多糖，其分子中的氮 基的多少，是随制备过程中脱乙酰基程廑的不同而不同，崮而所需交联剂量也不尽相同。 所以此 结果说明在本实验条件。，4％的戊二醛足以使该壳聚糖分子E的氨基充分交联，所形成的载体 与酶结合量已达最大， ——255 生产制备技术与制剂研究论文 全国第六届工业生化学术会议【1999，福建)论文集 2．2给酶量对固定化酶活力的影响 定化， 按同样方法测定酶插力，结果发现随所给酶量的增加，酶j舌力随着增火．fH“，给酶量增加 到‘定程度时，酶恬力水再增大． 这可能是f{Jf定量：乏联扃的载体，其活性基因姓定的，在 ◆ 其结合位点未被饱和之曲，同定化酶活力随给晦量增舢而增』‘，当结合位点破饱和聍， 增加给酶 量却不增加酶活力， 3．5mg蛋白j效果 在，仨实验条件F，1，Ogt8定化城体同定2mL酶液f相当j 较好，酶活回收率为46．6％ 2．3pit对酶活力的影晌 0 O～8 t测定 5mL，分别柏：4；t4pH值卜(2 平行取8份固定化酶1．OgSJ适当稀释的博酶液0 酶活力，发现固定化酶的最适pHi3．8，原酶的最适pH值为4．6。由F