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芥菜16个变种的RAPD研究
乔爱民·刘佩瑛:雷建军2
(1仲恺农业技术学院园艺系,广州5102252西南农业太学圊艺系,重庆柏0716)
提要利用咖技术对芥菜(胁池且m把c啷.)16个变种的遗传变异进行了研究。
从60个随机引物中筛选出27个有效引物,共扩增出336条mn带。其中扔条为多态性带,占
81.85%.平均每个引物扩增的DNA带数为12.d4条。利用19个有效引物扩增的枷条DN^带
对芥菜16个变种间的亲缘关系进行uPcA聚类分析,计算出16个变种间的平均遗传距离为
7.34,在此基础上建立了中国芥菜16个变种的DNA分子系统树图。该系统将芥菜的16个变种
划归^、B、c三个组,其中A维7个变种,B组8个变种。c组只有一个变种.B组又可细分为两个
皿组。对芥菜遗传多样性的分子基础进行了探讨。
关键词芥菜;变种;RAPD;遗传多样性
L)杂:交而形成的异源四倍体植物…。经过长期的自然选择和人工选择,芥菜在我国演化
出叶用、茎用、薹用和籽用等极为丰富的变种和品种【2j。迄今为止,芥菜“种”以下的分类仍
很混乱[3】。本文利用随机扩增多态性DNA(R址由)技术对中国菜用芥菜的全部16个变种进
行研究,在DNA分子水平上探讨芥菜不同变种之间的遗传关系,从而为进一步发掘和充分
利用我国的芥菜资源打下基础。
1材料与方法
1.1:时料
包括中国菜用芥菜已定名的16个变种,每个变种选一个代表品种。除花叶芥变种的材
料由上海农学院的黄丹枫博士惠赠外,其余15个变种由四川省涪陵地区农科所提供(表
1)。
1.2实验方法
1.2.1种子萌发
皿按一定间距摆放100粒种子,然后在光照培养箱中(不照光)25℃下萌发。6d后混合取幼苗
全株提取基因组DNA。
1.2.2基因组DNA的提取
见McCOIlch等…的方法。
1.2.3基因组DNA的纯度检测
利用shirrmdzu
379
基因组DNA的OD值,根据OD260/0D280的值判断其纯度。
表l芥菜的16个变种及其代表品种
Table1 Si)【teenv“eLiesand山eirreDH落日fI叫ve哪hivaIsofl邶tBId
墅堂 !竺塑 竖竺型!些竺 塑
1 L艟
大头芥V甜咧m啪1kld重庆大头菜0Im鹊i唱晰“ 重庆市al蚰日【l【s
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