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准确地确定凋亡细胞。表2显示药物处理细胞24h后,所统计的绿色凋亡细胞数,无论对敏感或耐药细胞,
Tet均能增强Dox诱导的凋亡活性。由于Dox自发荧光的干扰,用流式细胞仪未能区分这两类不同的细胞。
2,4揭亡的细胞与细胞周期的关系
利用凋亡细胞能从瓶壁脱离的特点,结合流式细胞光度术分析细胞周期分布,确定细胞弼亡与细胞周
期的关系。如果瀑浮的细胞与合并收集的细胞(漂浮和贴壁)的细胞周期有差异,说明某一期的细胞更容易
期的分布与单独处理组的细胞周期分布差异不明显,以上结果表明细胞凋亡与细胞周期无直接的关系。对
于耐药细胞来说,Tet+Dox处理过的漂浮细胞与合并收集的细胞的细胞周期分布基本一致,仅s期细胞有
所增多(图3,F、D)(略),也佐证了在敏感细胞中所得出的结论。
3讨论
本文通过线粒体染料Mitosens01”染色法和AnnexinV—FITC染色法,证实敏感及耐药细胞的凋亡特
征变化以及粉防己碱具有明显的逆转耐药细胞抗凋亡作用。由于粉防己碱的作用机理是增加阿霉素在细胞
内的分布,阿霉素在细胞内的增加并没有明显地增加G2M期的细胞,说明细胞凋亡可在细胞周期的任一期
发生,本结论与有关报道的结果相似。粉防己碱是一种十分有效的逆转耐药性的药物,本实验结果又证明它
对肿癯细胞的调亡抗性也具有明显的逆转作用,目前我们正从细胞内游离ca2+的变化,蛋白激酵C的活性、
mdro基因表达的变化等方面进行研究,以找出其作用的分子机制。
用阿霉素诱导细胞凋亡,不出现染色质凝集和凋亡小体,这可能与阿霉素特异地与细胞棱内的拓扑异构
酶Ⅱ结合有关。另外,阿霉素具有自发荧光,荧光发射谱与FITc、PI接近.因此能干扰某些凋亡检测方法的
效果。本文的方法无疑对与阿霉素相似的其他抗肿瘤药物诱导捅亡的研究,有参考价值。(参考文献略)
养正合剂对化疗及放疗的减毒作用研究
李明 曹于平1御晓采1皋聪1刘国卿1
南京210009)
(浙江是峰药业有限公司 叠华321000;1中国药科大学药理教研室
养正合剂是根据中医理论和临床经验组方而成的用于恶性肿瘤辅助治疗的新药,方中以人参补益元气,
以黄芪扶正祛邪,以猪苓利水渗湿.以枸杞滋补肝肾。为进一步了解其药理活性,我们在完成了其抗实验性肿
瘤研究的基础上.又进行了其对化疗及放疗的减毒作用研究。
1材料
动物:昆明种小鼠,雄性18~229,由南京药物研究所提供。
瘤株:Slso瘤株由江苏省肿瘤研究所提供。
养正合剂由浙扛衢州制药总厂提供,批号931206,每lml相当于原药材0.69。
2方法与培暴
2,1养正合剂对正常动物化疗的减毒作用
昆明种小鼠∞只,随机分成6组,每组10只,实验设生理盐水组、环磷酰胺组,环磷酰胺及茜草双醇组
O.)合用环磷酰胺组,连续给药10天,并于给药第7天始
(100mg,ff,g,P.O.)和养正合剂(7.5,15,309/kg,P
骨,分别测定血中自细胞、红细胞效,脾脏指数及小鼠骨髓DNA古量。结果见表1。
805
襄I养正台荆对正膏动■化疗的曩■作用【I±s
zxp0 05,**P00l与环礴酰胺组比较
0l与生理盐木蛆比较.·P0
2.2养正台剂对荷瘤动物化疗的减毒作用
分别测定血中白细胞数,脾脏指数及小鼠骨健DNA含量。结果见表2。
襄2彝正裔捌对荷一动物化疗的t●作用fi±s)
△-PO.0l与生曩盐永组比较,*PO.05,*-P0.01与环礴t胺组比较
2.3养正合剂对小鼠60co辐射的保护作用
2.3.1昆明种小鼠.雄性,随机分成6组,设1组为正常对照组,另5组小鼠经”c0单次照射,照射剂量为
骨,分剐计算脾脏及胸膝指效,潮定血中自细胞散及小鼠骨髓DNA含量,结果见表3。
囊3彝正台剂对正常动糟化疗的藏鼍作用{i±s)
zxzxp0.01与生理盐水组比较,*P005,**P00l与”co模壹组相比。
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