浙贝母碱逆转白血病细胞多药耐药地研究.pdfVIP

第八届全国中西医结合肿瘤学术会议论文集 过程。胃粘膜的损害是致变、致癌因素作用基础，因此胃粘膜病变的修复对异型增生的治疗尤为重要， 本研究在健脾为主的方剂中加入了具有消炎作用的清热解毒类中药，结果也显示本方能较好地治疗胃 粘膜病变作用。 4．细胞的DNA含量与细胞分裂、增殖有直接关系，细胞的异型和病理性增殖能反映在细胞DNA的 脾为主方剂有阻碍胃粘膜过度增殖分裂作用。因此认为抑制胃糕膜过度增殖和分裂是健脾为主方剂治 疗胃异型增生的机理之～。 (参考资料略) 浙贝母碱逆转白血病细胞多药耐药的研究 胡凯文1 郑洪霞1 齐静2 侯丽1 左明焕- 陈信义， 孙颍立 许元富2 邵晓枫2 杨纯正2 1．北京中医药大学东直门医院(北京!00700)，2中国医学科学院血液学研究所 1．材料与方法 1．1细胞株 药物室诱导并提供。对阿霉素耐药40倍，对三尖杉酯碱，眭春新碱，vPl6，柔红霉素等交叉耐药。 学科学院血液学研究所药物室引自日本国细胞库并提供作者使用，肘5口』霉素耐药1∞倍，对三尖杉酯 碱，长春新碱，VPl6，柔红霉素，氢甲喋呤等交叉耐药。 1．2药品与试剂 滴入lK HcI至溶解，以RPMIl640培养液补足2ml体系(PM．cL)，Ph值等于j。 阿霉素、柔红霉素(标准品，p生部药品检定所，批号：9305)，无血清培养液配制，分装，一20℃ 国sIGMA公司)，小牛血清(军事医学科学院)，mT(进口，华美公司分装)。 实验用品及仪器：培养瓶，培养板，二氧化碳培养箱．酶标仪，液相色谱仪。 l 3细胞毒试验 应生长12小时，分组加入实验药物各20u1，设无缸清培养液调零孔和不加药细胞空白对照组，每组设 三个平行孔，每孔终体积为200ul，不足部分以药物溶剂补足。置二氧化碳培养箱中，37℃，饱和湿度， 第八届全国中西医结合肿瘤学术会议论文集 甲亚砜(DMS0)150u1，微量振荡器振荡，充分溶解药物。酶标仪检测540nM波长oD值。 1．4细胞内柔红霉素浓度测定 向生长良好的用药和对照组中加入柔红霉素(DNR)终浓度为2mM，细胞浓度调至5×105／珊1，37℃， 恒温水浴，取时间点为1、2、3小时，各组细胞用生理盐水洗涤两次，冰浴。流式细胞仪(FAcs)测 定各组细胞荧光强度，激发波长为488州，功率260mw。仪器用10uM直径的荧光球校正，c、『值3％， 发射光用550nM波长带滤色片测红色荧光强度。直角和90度角散射光分别测定细胞大小和内部结构。 用提高副角光散的阈值除去死细胞黑细胞碎片，采用Log单号数1024道直方图收集数据。每个样品分 析10，000个细胞，用Inter30l计算机作数据处理。软件系统为EASYZ。 。 1．5 Pgp蛋白表达的分析 荡混匀．30分钟：PBS洗涤两次，方法同上，弃上清。PBS重新悬浮细胞：FAcs检测各组细胞荧光强 度，每孔检测3000～lO，ooO个细胞，仪器条件同上。 1．0计算公式 实验组0D值一调零孔0D值 细胞生长抑制率IR=1 对照组oD值一调零孔oD值 Ic5。=抑制率为50％时的药物浓度 耐药细胞IC50 耐药倍数= 敏感细胞IC5。 无增敏剂时耐药倍数 增敏倍数= 有增敏剂时耐药数 ， 2．结果 2．1 K562／A02，HL60／Adr，细胞株耐药倍数测定 墅堕选