载脂蛋白E多态性和心肌梗塞关系的研究.pdfVIP

全国第五届脂蛋白和动脉粥样硬化学术研讨会98年5月 ：、f年}、啦载脂蛋白E多态性与心肌梗塞关系的研究 陆元善 吴文俊 +金炜 一庄庆祺 “吴满平 “梅美珍 上海市第一人民医院检验科 上海市第一人民医院心内科200080 +上海医科大学药学院生化教研室200032 摘 要 载脂蛋白E的基因型进行检测，发现心梗幸存者中携带e．的例数及￡。／￡。基因型的例数高于人群 性患者；男性患者的基因型分布及等位基因频率与同性别对照组无统计上的差异。说明载脂蛋白E 基因的多态性对心肌梗塞的发病有影响，女性较为明显，男性可能还有其它因素的作用，如高血压、 吸烟、紧张等。 关键词：载脂蛋白E基因型 心肌梗塞等位基因 成份，在脂质代谢中起着非常重要的作用。CM残体经肝apo E的结构基因存在多态性，在单个基因位点 过识别结合有apoB或apoE的LDL受体清除…。apo 上有三种主要的等显性等位基因e：、￡。￡。。三种主要等位基因中的任二个组合产生六种不同的基因 E多态性与脂质代谢异常有关，高脂 型‰／e。、e。／E3、￡。／￡3、e。／e。、c4／e；、￡。／e，。“。流行病学研究表明apo 血症是动脉粥样硬化危险因子之一。近年来，许多学者对心肌梗塞幸存者及血管造影证实有冠状动 脉病变患者的研究，发现等位基因￡。有致动脉粥样硬化的作用，而￡。则有对抗作用o“1。流行病研究 发现芬兰人群中．中年人冠状动脉病变的死亡率是世界上最高国家之一，其e。的人群分布频率也相、 当高。有研究表明心肌梗塞病人的￡。频率高于对照组．但也有研究表明等位基因e。的频率高低与 心肌梗塞的发病无关，甚至有学者研究发现心梗患者的￡；频率低于对照组。。。 E基因型进行分析、比较，评价心梗的发病是 本文就44例心梗幸存者及191例体检者的apo E基因多态性有关。 否与apo 材料和方法 材料：DNTP、Taq多聚酶、Hha A TAA T G TAA TA A AACTGA(?CCCGG GG 物：P。5’一AC G一3’；P。5’一A T CG T ATATATAATAAT(；GCGC GAGGC C C一3’。 DNA扩增仪(英国)、DY—A电泳仪(上海生化所) 仪器：Progene 血样：心梗组为临床以心电图及酶谱变化诊断为心梗的患者。对照组为体检者。所有受检对象 抽静脉血2．7ml加0．3mii09mmol／L的枸椽酸钠抗凝。 基因型分析： C一小时。取出， 加入蒸馏水，并将沉淀打碎。再离心，沉淀加入核悬浮液、10％SDS、蛋白酶K，56 先用等体积饱和重蒸酚、再用等体积饱和重蒸酚加等体积氯仿及等体积氤仿各抽提一次，最后取上 195 全国第五届脂蛋白和动脉粥样硬化学术研讨会98年5月 Lp(a)与apoE 层水相加人2倍体积的一20C纯乙醇，高速离心。沉淀用70％冷乙醇洗涤一次。所得沉淀用TE溶 解。 8ul(1 Tris—HCl