腺病毒3型对健康人外周血单个核细胞MxA蛋白的诱导作用地研究.pdfVIP

15．腺病毒3型对健康人外周血单个核细胞MxA蛋白 的诱导作用的研究 苏州医学院附属儿童医院贡海蓉徐仑 苏州医学院基固宣 扬吉成盛传华 血单个核细胞，应用流式细胞仪检测臆浆内MxA蛋白含量．结果：各组MxA 蛋白含量均显著高于对照组。说明腺病毒3型体外可诱导单个核细胞的MxA 蛋白的产生． 关键词 干扰素(IFN)MxA蛋白抗病毒作用 o／B 病毒可以诱导IFN r产生，然后激活MxA蛋白的表达。国外已有的 研究表明，流感病毒、VSV、Thogoto、汉坦病毒体外刺激培养细胞，可以诱 导MxA蛋白的产生。在临床上也有报道在病毒感染患者的单个核细胞中MxA 蛋白含量增高，腺病毒在儿科较常见且危害较严重，腺病毒3型是否能诱导 MxA蛋白的产生．国外也未见报道。因此，我们选择腺病毒3型，研究其对 MxA蛋白的体外诱导作用。 一、材料与方法 1．材料病毒株 3型(Ad3)为我院基因室保存。在Hela细胞上用微量 细胞病变法测定效价，其效伽(TCID)为10～／ml。 2．方法 2，1分离正常人外周血单个核细胞。 2．2取106／ml细胞悬浮液2m1分四个实验组和细胞对照组、病毒对照组。 24小时。 2。3收集细胞经处理送FACS检测。 二、结 果 我们采用流式细胞仪器检测了不同剂量的Ad3作用正常人外周血单个核 细胞24小时后其MxA蛋白含量，结果见表2，相应的荧光强度变化。 由表2及图6可看出，不同剂量的病毒均能诱导MxA蛋白的产生，24小 时后表达MxA蛋白的阳性细胞率及其平均荧光强度均与对照组有显著差异。 表2 Atl3诱导单个核细胞MxA蛋白含量(n=4) MxA蛋白 组 别 荧光阳性细胞率％ 平均荧光强度(MFI) ·PO．0l 三、讨论 诱导出MxA蛋白产生，MxA蛋白的阳性细胞率和平均荧光强度均高于对照 组。另外，随着病毒浓度的增高， MxA蛋自标记阳性细胞率呈下降趋势。我 效价太高，引起了细胞的病变，细胞对外界信号的反应更差，细胞膜出现破裂， 因而导致标记阳性细胞率呈下降趋势。 异性。 MxA蛋白的这些生物学特征，使得它成为临床病毒感染早期诊断以及病 毒、细菌感染的鉴别诊断的较好的候选指标。 外周血淋巴细胞内MxA蛋白水平，结果发现病毒感染组MxA蛋白含量明显 患儿鼻咽部分泌物中MxA含量，并作为病毒与细菌感染指标。其敏感性和特 异性分别为92％和97％，均比白细胞计数与C反应蛋白高。本研究也检测了 部分感染患儿外周血白细胞MxA蛋白的含量，因病例少，因此数据未列出。 结果也提示病毒感染组MxA蛋白含量较非病毒感染组高。 当然MxA蛋白作为病毒与细菌感染的鉴别指标，方法还需迸一步完善， 以提高敏感性和特异性。 参考文瓤：略 {6．MxA蛋白抗病毒作用的初步研究 苏州医学腕附属儿童医院贡海蓉徐仑 苏州医学院基因室 杨吉成 盛传华 摘要 毒(VSV)和隙病毒3型(Ad3)的作用。结果表明， MxA蛋白10ng／ml在 Vero细胞上同IFN“b10IU／ml一样可以抗20TCID 20TCID5。；在Hela细胞上，MxA蛋白与IFN“b一样可能抗20TCID50的Ad3。 提示MxA蛋白具有明显的直接抗病毒作用。 关键词 干扰素(IFN)MxA蛋白抗病毒作用 细胞，可咀使MxA。细胞获得抗病毒能力Ⅲ1，另外转基因鼠也证实了MxA的 抗病毒能力f”】。但这些方法都是以间接的方法证实MxA蛋白的抗病毒作用。 本研究拟采用重组MxA蛋白，并用IFN。。作为阳性对照，利用微量病变抑制 法，直接观察MxA蛋白的抗病毒作并!。现报告如下： 一、材料与方法 1．材料 1，I细胞Vero、Wish、Hela细胞株均为本院基因