干酪乳酸杆菌对新生大鼠TLR2与CD206的影响及其免疫调节作用的可能机制的探讨.pdfVIP

2009全国新生儿学术研讨会2009．06深圳 神经干细胞是指具有分化为神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞的能力，能够tl我更新并能 够形成神经组织的细胞：它具有免疫豁免性、良好的融合和迁徙能力。动物实验证明，神经干细胞 由脑室植入，能直接突破血脑屏障，迁徙至脑实质，并与宿主细胞在形态和功能上形成良好的整合， 从而参与神经结构和功能的修复与重建。移行至损伤皮层的移植细胞绝大多数都分化为类似宿主神 经元的细胞，而位于迁移途径中的移植细胞则大多数分化为星形胶质细胞，既往多认为星形胶质细 胞在脑内主要是形成瘢痕，现更多研究发现星形胶质细胞在脑中能起到构建细胞迁移支架，分泌神 经营养因子的作用。目前，神经干细胞移植有报道用于治疗亨顿氏病、帕金森症、脑卒中后遗症等 疾病，我科在多年动物试验的基础上开展了神经干细胞移植治疗新生儿获得性脑损伤，通过临床观 察随访，认为对于此类患儿有明显治疗效果，能有效降低其神经系统后遗症的发生率。 本组治疗的7例新生儿在移植术后未给予抗排斥治疗，基于以下几点考虑：(1)中枢神经系统 因血脑屏障的存在，被认为是免疫相对豁免区，且大量动物实验证明，即使给新生小鼠移植人NSCs， 也能长期存活并分化：(2)决定移植排斥反应的nAⅡ型抗原在NSCs表达很低或不表达；(3)新 生儿免疫功能尚未发育成熟，主要免疫器官胸腺，植入细胞可能通过T细胞阴性选择达到免疫耐受 和长期存活。 本组hNPCs移植治疗新生儿获得性脑损伤有效，但需要大样本、双盲对照研究进一步证实疗效。 表3hNPCsT后远期变化表 注：a新生儿期合并重症肺炎、肝炎综合征，后因家庭经济原因未能复诊，诊断脑瘫；b新生儿期合并肠梗阻、 先天性白内障、重症肺炎，因家庭经济原因未能复诊，诊断脑瘫：C、d分别为3、7个月时情况 干酪乳酸杆菌对新生大鼠TLR2和CD206的影响及 其免疫调节作用的可能机制的探讨 王艳丽张永陈运彬广东省妇幼保健院新生儿科广州510010 越来越多的研究发现益生菌不仅通过提高机体的获得性免疫水平增强机体的免疫防御能力， 同时也能增强宿主对病原的先天性免疫反应，辅助免疫清除。干酪乳酸杆菌是乳酸杆菌的一种，它对 感染性疾病、过敏性疾病及提高免疫功能的作用已得到许多研究的证实，而目前的研究集中在其作 2009全国新生儿学术研讨会2009．06深杉 用机制方面，有研究发现益生菌(如乳酸杆菌)的细胞壁被溶菌酶作用而释放出的病原相关分子模 式(PAMP)可以通过与模式识别受体(PRRs)结合而激活先天免疫反应，并通过效应因子激活获 通过观察干酪乳酸菌对TLR2和CD206的作用来探讨益生菌对新生大鼠的免疫激活作用，现报道如 下。 材料和方法 一、材料 1．实验动物与分组：新生SD大鼠64只(广东省中医药大学实验动物中心)，称重、编号后，随机 分为对照组、实验组，各组再以第l、2、3、4周为时间点分为为4个亚组，每组8只，清洁级实验 室饲养。益生菌选用益力多干酪乳酸杆菌活菌，由日本益力多广州分公司提供(商品名：益力多)。 2．主要试剂和仪器： (1)TLR2(单克隆羊抗鼠．FITC)抗体：美国SANTACRUZ生物公司； (2)CD206抗体(多克隆兔抗)美国SANTACRUZ生物公司：(3)二抗(羊抗兔．町C)：广州 市吉辉生物有限公司； (4)胎牛血清蛋白：杭州四季青公司：(5)全自动生物组织脱水机，沈阳 市龙首电子仪器有限公司； (7)OLIMPUS荧光显微 (6)Olympus切片机，日本Olympus公司； (8)DMIL．RFl荧光倒置相差显微镜，上海优浦科学仪器有限公司。 镜，日本Olympus公司： 二、方法 1．灌胃：实验组O．1ml益力多(I*109CFU／只)，对照组每只每天O．1ml生理盐水灌胃，共4周。 2．取材：实验第l、2、3、4周同一时间点随机抽取8只新生SD大鼠用10％水合氯醛3．5ml／kg， 腹腔麻醉，常规消毒，取腹部正中切口入腹腔，在无菌条件下取出在距阑尾10cm处取1段长约2cm 的大鼠小肠组织，放入PBS液中冲洗，然后放入多聚甲醛中固定，制备石