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201013 Crops
马蔺 V-ATPase c亚基基因家族的克隆及序列分析
付慧娟 周爱民 车代弟 王金刚
( , 150030, )
植物V-ATPase在逆境条件下的应答 c,
功能对保证细胞的正 生命活动具有重要作用本 [ 6]
, c
研究根据 GenBank收录的外源V-ATPase c亚基, 设 V-ATPase
计简并引物, 以马蔺为材料, 通过 RT-PCR 进行扩 [ 7]
, Im ara
增, 经测序该片段为 471bp, 包含 V-ATPase基因家 4, AVA-P1 AVA-P2A VA -
族的保守结构域, 以该片段为靶序列进行 5c-RACE P3 AVA-P,4A VA - P1~ AVA-P4 ,
延伸, 将产物测序得到 186bp的序列, 将靶序列与 , c
5c-RACE产物进行拼接, 根据拼接结果设计特异引
物, 克隆基因全长读码框结果表明, 得到马蔺 1/ 5,
VHA-c亚基家族的 5 个成员,片段全长 632bp, 包括 ( Iris lac tea
137bp 5c-UTR, 开放读码框全长 495bp, 编码 164 个 var1ch inensis F isch 1Koidz1),
氨基酸,分子量约为 16k a, 包含 4 个跨膜结构域 ,
将该基因命名为 IrlVHA- c1~ c5 , V-
马蔺; c亚基; V-ATPase ATPase c,
+ + 1
, H -ATPase(V-H -
ATPaseV-ATPase) 111
, , V-ATPase
( Iris lactea var1ch inens is F isch 1Koidz1)
+
, ATP H ,
,, - 80e
, pH ,
112
GenBank V-ATPase c
[ 1- 3] V-ATPase,
( GenBank no1NP177693;
, / 0,
[3] NP001150274; O22552; NP001047092; NP564098;
F-ATPase ,
CAA65063; BAA75516; AAF04597), NAMAN
, (V ) (V )
1 0 ,
V
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