RP—HPLC定量检测蛹虫草培养基中活性成分.pdfVIP

第32卷 第8期 河 南 科 学 Vol-32 No．8 2014年8月 HENAN SCIENCE Aug．2014 文章编号：1004—3918(2014)08—1436-04 DOI：10．135376．issn．1004—3918．2014．08．014 RP—HPLC定量检测蛹虫草培养基中活性成分 刘 丽1,2， 孙玉飞1,2， 冯 菲 一， 刘亚博 ， 尼宵阳。 (1．河南省科学院 生物研究所有限责任公司，郑州 450008： 2．河南省微生物工程重点实验室，郑州 450008： 3．河南农业大学，郑州 450008) 摘 要：建立一种反向高效液相色谱法定量检测蛹虫草培养基中活性成分腺苷含量和虫草素含量的方法．色谱 柱为EclipseXDB—C18柱 (4．6mmX150mm，5 m)；流动相 ：0．02mol／LKH2P04：甲醇 (体积 比85：15)溶液 ；流速 ： 1．0mL／min：检测波长：260nm．腺苷的线性测量范围为O．5～100I~g／mL(R=O．9999)，平均回收率为105-3％，标准品 RSD=0．76％(n=5)，样品RSD=1．87％(n=5)；虫草素的线性测量范围为0．5～100Ixg／mL(R=0．9999)，平均回收率为 104．0％，标准品RSD=0．95％，样品RSD=1．23％．本测定方法线性范围宽、分离度好、具有 良好精密度，可定量、准确 分析不同蛹虫草培养基中活性成分腺苷和虫草素含量． 关键词：反相高效液相色谱法；蛹虫草培养基；腺苷检测；草素检测 中图分类号：O657．72 文献标识码 ：A DeterminationofBioactiveComponentsinCultureM edium ofCordyceps militarisbyReversed-PhaseHighPerformanceLiquidChromatography LiuLi一， SunYufei～， FengFei～， LiuYabo， NiXiaoyang (1．InstituteofBiology，HenanAcademyofSciences，Zhengzhou450008，China； 2．KeyLaboratoryofMicrobialEngineeringofHenanProvince，Zhengzhou450008，China 3．HenanAgricuIturalUniversity，Zhengzhou450008，China) Abstract： A methodwasestablishedforthequantitativedeterminationofbioactivecomponents，adenosineand cordycepin，inculturemedium ofCordycepsmilitarisbyreversed—phasehighperformanceliquidchromatography． TheseparationwasperformedonEclipseXDB—C18column，Themobilephasewas0．02mol／Lphosphatebuffer solution—methanol(volumeratio85：15)．Theflowratewas1．0mL／min，andthedetectionwavelengthwas260nm． Thelinearmeasurementrangeofadenosinewas0．5~100Ixg／mL(R=O．9999)；itsaveragerecoverywas105-3％；its standardRSD=0．76％(n=5)：anditssampleRSD=I．87％(n=5)．Thelinearmeasurementrangeofcordycepinwas 0．5～100 g／mL(R