益生菌对结肠炎小鼠空肠上皮PepT1介导的氨基酸吸收功能影响的实验的研究.pdfVIP

2011 全国肠外肠内营养学术会议论文集 益生菌对结肠炎小鼠空肠上皮PepT1介导的氨基酸 吸收功能影响的实验研究 1 1 2 2 1 陈红旗 ，周玉坤 ，张旻 ，杭晓敏 ，秦环龙 1 2 （ 上海市第六人民医院普外科， 上海交大昂立医药研究院，上海交通大学，上 海，200233） 摘要：目的 尽管已有研究表明益生菌能有效预防和治疗结肠炎症，而有关益生菌对肠道营 养素的吸收，尤其是PepT1介导的饮食蛋白的吸收研究报道较少。本实验研究益生菌对结肠 炎小鼠空肠黏膜上皮PepT1介导的氨基酸吸收功能的影响及其调控机制。方法 以白介素10 -/- 基因敲除（IL-10 ）小鼠为结肠炎模型，益生菌采用植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum, LP）实验分成四组，即对照组（WT）、WT+LP、IL-10-/- -/- 、IL-10 +LP，LP灌胃干预四周后， 通过建立空肠原位单通道灌流小鼠模型，以头孢氨苄为PepT1特异性底物，利用HPLC方法对 血浆氨基酸和头孢氨苄含量进行检测，以此反映PepT1转运活性；Western blot、免疫荧光 和RT-PCR技术对PepT1表达和分布进行分析，并利用活性分析试剂盒和Western blot技术对 蛋白激酶C（protein kinase C, PKC）活性及其磷酸化水平进行检测。结果 与IL-10-/-小鼠 相比，LP干预能有效阻止IL-10-/-+LP小鼠血浆总的氨基酸含量和头孢氨苄含量降低，而 Western blot和RT-PCR分析发现PepT1蛋白和mRNA在各组小鼠空肠黏膜上皮的表达并无统计 学差异。此外，研究发现IL-10-/-小鼠空肠黏膜上皮存在PKC活性及其磷酸化水平下调，LP 干预治疗能有效阻止以上改变。 结论 LP能通过上调PepT1转运活性增加血浆氨基酸含量， 这与LP能增强PKC活性及其磷酸化水平有关，而与PepT1表达和分布异常无关。 关键词: 植物乳杆菌（LP），寡肽转运体1（PepT1），氨基酸，蛋白激酶C（PKC） The effect of probiotics on PepT1-mediated absorption of amino acids in the jejunum of colitic mice AbstractAim：Although probiotic consumption has generally been shown to have many beneficial effects for prevention and treatment of inflammatory bowel disease, the effects of Lactobacillus plantarum (LP) on intestinal nutrient absorption, particularly PepT1-mediated absorption of dietary protein under inflammatory conditions, has not yet been characterized. Methods: We first investigated the effects of LP consumption on plasma amino acid concentrations and PepT1-mediated absorption of cephalexin in the small intestine of wildtype mice and interleukin-10 knockout (IL-10-/-) mice,