侵染水仙的虎眼万年青花叶病毒外壳蛋白的原核表达, 抗血清制备及应用.pdfVIP

侵染水仙的虎眼万年青花叶病毒外壳蛋白的原核表达, 抗血清制备及应用.pdf

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浙江农业学报 ActaAgriculturaeZhejiangensis21 3 :198~201,2O09 侵染水仙的虎眼万年青花叶病毒外壳蛋白的原核表达、 抗血清制备及应用 郑红英,鲁宇文,沈嘉乐,林 林,陈 炯,陈剑平 浙江省农业科学院 病毒学与生物技术研究所,浙江 杭州 310021 摘 要:采用特异性表达引物PCR扩增了一个从英国围裙水仙样品上分离的虎眼万年青花叶病毒外壳蛋白 基因序列。构建原核表达载体 ,制备了OrMV分离物的外壳蛋白抗血清。对制备的抗血清进行了w姗 bl0t 检测,血清学关系研究并应用于样品的间接ELISA检测。 关键词:虎眼万年青花叶病毒;原核表达;抗血清制备;间接 EIJSA 中图分类号:s432.41;q78 文献标识码:A 文章编号:1004—1524 2009 03—0198—04 Prol~uryoticexpressionofcoatproteingeneof~ ga/um mosac/v/rusanditsuse intheantiserum prepar4tion ZHENGHong-ying,LU Yu-wen,SHENJia-le,LINlin,CHENJiong,CHENJian-ping InstituteofVk~logyandBiotechnology,ZhejiangAcademyofAgri~ oZSciences,na,~hou310021,China Ah妞曩ct:CoatproteingeneofOrnithogalum mosaicvirus OrMV wasamplifiedfrom avirusinfectedNarcissus bulbocodium samplefrom UK byRT-PCR.ThecoatproteinofOrMV wasprokatyoficexpressed,purifide andused in preparationofantisenunagainstthevirus.OrMVhtenwasdetcetde inSOIIlelocalandimportednarcissus鲫ll Iesl】sjillgthis Ilnl~ lllInbyanindirectEHSAmethod.andserologicalrelationshipbetweenOrMVandohternarcissusvirusesweIedis- cussed. . ywords;Orn/thogau/mmosacivr/us OrMV ;prokaryoficepxression;antiserumpreparation;indirectEIJSA 水仙是一种观赏花卉,主要 由鳞茎繁殖,由 虎眼万年青花叶病毒 Ornithogalummosaicvirus, 于长期的无性繁殖,造成植物病毒在水仙中大量 V 及香石竹潜隐病毒属、马铃薯 x病毒属的 积累,种球变小,鳞茎退化,严重影响水仙的观赏 成员。已明确 NYSV是侵染 中国水仙的主要病 价值和生产发展。目前已经报道的侵染水仙的 毒,NLSYV在进 口水仙上广泛发生,而 OrMV时 病毒多达 20余种,其中侵染水仙的线状病毒主 常与这些病毒一起发生,造成复合侵染。 要有马铃薯Y病毒属的水仙黄条病毒 Narcissus OrMV最早由Smith和 Brierley报道于美国, yellowstripevirus,NYSV 、水仙迟季黄化病毒 现在在荷兰、以色列、新西兰、韩 国、非洲和澳大 Narcissuslateseusortyellwosvirus,NLSYV 、水仙 利亚等地都有分布[圳 。病毒粒子线状,长 720 退化病毒 Narcissusdegenerationvirus,NDV 和 760nln,直径 12nln。由蚜虫以非持久性方式 传播,可侵染天南星科、鸢尾科、茄科、藜科、番杏 收稿 日期:2008—12—28 科、百合科立金花属和风信子科 中的一些植 基金项 目:973前期项 目 2006CB708209 ;国家 自然科学基金 物[2-5]。自然情况下,该病毒侵染虎眼万年青属 3a77l402 ;浙江省自然科学基金 Y3 169,Y3O8o4l7 资助。 作者简介:郑红英0977一 ,女,湖北汉川人,博士研究生,助理 和非洲莲香属的植物,导致花叶、花畸形和种质 研究员,主要从事植物病毒与寄主的分子互作机理研究。B 退化。血清学研究表明OrMV与菜豆黄色花叶病 mail:zl~ @163.o0n1 *通讯作者,陈剑平,E-mail:jpehen2001@yahoo.oorn.∞ 毒 Beanyellowmosacivirus,BⅢ 、

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