长蛸胃肠道产蛋白酶菌的筛选及粗酶性质研究.pdfVIP

2015年 3月 四川大学学报 自然科学版 M ar． 2O15 第 52卷 第 2期 JournalofSichuanUniversity NaturalScienceEdition Vo1．52 NO．2 doi：103969／j．issn．0490—6756．2015．02．031 长蛸 胃肠道产蛋 白酶菌的筛选及粗酶性质研究 王玉荣 ，金玉兰 ，孙淑静 ，朴美子。 1．青岛农业大学化学与药学院，青 岛 266109；2．青岛农业大学食 品科学与工程学院，青岛 266109 摘 要 ：通过透明圈法从长蛸 胃肠道 内筛选 出4株产蛋 白酶的菌株 ，L一1、L一2、L一3、L一5，采用 偶氮酪蛋白法测定粗酶液蛋 白酶活力 ，采用 SDS-PEAG活性 电泳测定粗酶液 中具有蛋 白水 解活性的蛋 白酶的种类及分子量．菌株 L-2产蛋 白酶 比酶活最 高，达到 4．80U／~g，菌株 L一1 比酶活最低为 3．31U／g．菌株 L．2粗酶液 中含有 4种酶活较高的蛋 白酶 ，分子量分别为 105．2、86．9、69．3、37．8kD，其他 3株菌株的粗酶液 中各蛋 白酶分子量相近．菌株 L一1和 L一2 蛋 白酶最佳反应 温度为4O℃ ，最佳反应 pH 为 8．0；L一3产蛋 白酶的最佳反应温度为 50℃，最 佳 pH为 7．0；菌株 L一5产蛋白酶在温度为 60℃，pH为8．5时有最大酶活力． 关键词 ：长蛸 ；胃肠道；蛋 白酶 ；酶学性质 中图分类号：Q51 文献标识码 ：A 文章编号 ：0490—6756 2015 02—0393—04 Screeningofprotease—producingbacterium from thegastr0intestinaltract ofOctopusvariabilisandenzymaticproperties WANG Yu—Rong ，JIN Yu～Lan ，SUN Shu—Jing ，PIAOMei—Zi 1．CollegeofChemistryandPharmaceutica1Sciences，QingdaoAgriculturalUniversity，Qingdao266109； 2．CollegeofFoodScienceandEngineering，QingdaoAgriculturalUniversity，Qingdao266109，China Abstract：Fourstrainswithhighyieldandstronghydrolaseactivityproteasewereisolatedfrom thegas— trointestinaltractoftheOctopusvariabilisbytransparentcirclemethod．Theactivityofproteasewasde- terminedbyazocaseinmethod．TheproteaseproducedbystrainL一2hasthehighesthydrolaseactivity， 4．80U／x／g．Besides，theactivityofproteasesproducedbystrainL一1wasupto3．31U ／~／g。whichwas theIowestofthefourstrains．ThemolecularweightsofproteasesproducedbystrainL一2wereestimated at105．2，86．9，69．3，37．8kD bySDS— theproteasesfrom strain L一1，L一2were40℃ and8．0．Theproteasesproducedby strain L一3andL一5 havethehighestactivityat50，60℃ and8．5，7．0，respectively． Keywords：Octopusvariabilis；Gastrointestinaltract；Protease；Enzymaticproperty 肉食动物”，消化系统 中存在大量蛋 白酶可以将食 1 引 嗣 物中5O 的蛋白质转化为 自身 的蛋 白质 ，以适应 长蛸 Octopusvariabilis ，头 足纲八腕 目蛸 其食 肉特性和生长迅速 的特点Ⅲ ． 科 ，主要分布于我 国南北近海 ，为沿岸底栖种类 ， 蛋白酶广泛存在于动物和人的消化道 中，对 以蟹类 、贝类、虾类 、鱼类为主食 ，被称为 “凶残 的 蛋白质的消化吸收起着非常重要的作用r-．蛋白酶 收稿 日期 ：2O13—10—31 基金项 目：山东省 自然科学基金 ZR2011CM023 作者简介